中医正骨
中醫正骨
중의정골
THE JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE ORTHOPEDICS AND TRAUMATOLOGY
2010年
4期
3-6
,共4页
金杰%朱立华%张桦%闻永根%徐国坤
金傑%硃立華%張樺%聞永根%徐國坤
금걸%주립화%장화%문영근%서국곤
戴村骨伤膏%提取液%胎盘源性间充质干细胞%骨诱导
戴村骨傷膏%提取液%胎盤源性間充質榦細胞%骨誘導
대촌골상고%제취액%태반원성간충질간세포%골유도
目的:为了研究戴村骨伤膏对骨折愈合的影响,我们通过人胎盘源性间充质干细胞(hPMSC)的体外细胞试验,观察药物对干细胞成骨诱导分化的影响.方法:在体外培养的hPMSC中,加入不同药物剂量浓度的实验药液和成骨诱导液混合液,诱导2~4周后进行检测.采用偶氮偶联法进行碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞形成.Von Kossa染色法鉴定钙结节形成.以鼠抗人I型胶原单克隆抗体为一抗,羊抗鼠SABC为二抗,进行免疫组织化学染色.用流式细胞仪检测细胞表面标志.结果:hPMSC在诱导培养基培养条件下3 d出现细胞变粗,1周后细胞变为多角形或者是圆锥形,周边出现丝状突出,2周可见细胞基质矿化物逐渐出现,形成多层小结结构.实验2周后细胞基质内出现钙化,4周Von Kossa染色钙结节阳性,程度随药物剂量递增,药物诱导组(50 mg·L-1)可见大量的黑色钙结节,单纯诱导组可见少量黑色钙结节形成,而对照组在任何时间都没有阳性反应.药物诱导2周后细胞碱性磷酸酶染色阳性,并且程度与药物剂量成正比,而单纯诱导液组的染色为弱阳性,未经诱导的显示阴性.经流式细胞术检测细胞表型发现经诱导而成的成骨细胞细胞表型无改变,表明其来源来自间充质干细胞.结论:戴村骨伤膏提取液能促进胎盘源性间充质干细胞成骨诱导分化,并且随药物剂量增加而效果提高.
目的:為瞭研究戴村骨傷膏對骨摺愈閤的影響,我們通過人胎盤源性間充質榦細胞(hPMSC)的體外細胞試驗,觀察藥物對榦細胞成骨誘導分化的影響.方法:在體外培養的hPMSC中,加入不同藥物劑量濃度的實驗藥液和成骨誘導液混閤液,誘導2~4週後進行檢測.採用偶氮偶聯法進行堿性燐痠酶染色鑒定成骨細胞形成.Von Kossa染色法鑒定鈣結節形成.以鼠抗人I型膠原單剋隆抗體為一抗,羊抗鼠SABC為二抗,進行免疫組織化學染色.用流式細胞儀檢測細胞錶麵標誌.結果:hPMSC在誘導培養基培養條件下3 d齣現細胞變粗,1週後細胞變為多角形或者是圓錐形,週邊齣現絲狀突齣,2週可見細胞基質礦化物逐漸齣現,形成多層小結結構.實驗2週後細胞基質內齣現鈣化,4週Von Kossa染色鈣結節暘性,程度隨藥物劑量遞增,藥物誘導組(50 mg·L-1)可見大量的黑色鈣結節,單純誘導組可見少量黑色鈣結節形成,而對照組在任何時間都沒有暘性反應.藥物誘導2週後細胞堿性燐痠酶染色暘性,併且程度與藥物劑量成正比,而單純誘導液組的染色為弱暘性,未經誘導的顯示陰性.經流式細胞術檢測細胞錶型髮現經誘導而成的成骨細胞細胞錶型無改變,錶明其來源來自間充質榦細胞.結論:戴村骨傷膏提取液能促進胎盤源性間充質榦細胞成骨誘導分化,併且隨藥物劑量增加而效果提高.
목적:위료연구대촌골상고대골절유합적영향,아문통과인태반원성간충질간세포(hPMSC)적체외세포시험,관찰약물대간세포성골유도분화적영향.방법:재체외배양적hPMSC중,가입불동약물제량농도적실험약액화성골유도액혼합액,유도2~4주후진행검측.채용우담우련법진행감성린산매염색감정성골세포형성.Von Kossa염색법감정개결절형성.이서항인I형효원단극륭항체위일항,양항서SABC위이항,진행면역조직화학염색.용류식세포의검측세포표면표지.결과:hPMSC재유도배양기배양조건하3 d출현세포변조,1주후세포변위다각형혹자시원추형,주변출현사상돌출,2주가견세포기질광화물축점출현,형성다층소결결구.실험2주후세포기질내출현개화,4주Von Kossa염색개결절양성,정도수약물제량체증,약물유도조(50 mg·L-1)가견대량적흑색개결절,단순유도조가견소량흑색개결절형성,이대조조재임하시간도몰유양성반응.약물유도2주후세포감성린산매염색양성,병차정도여약물제량성정비,이단순유도액조적염색위약양성,미경유도적현시음성.경류식세포술검측세포표형발현경유도이성적성골세포세포표형무개변,표명기래원래자간충질간세포.결론:대촌골상고제취액능촉진태반원성간충질간세포성골유도분화,병차수약물제량증가이효과제고.
