中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2010年
2期
18-22
,共5页
兰文升%刘荭%高隆英%史秀杰%郑晓聪%何俊强%卢体康
蘭文升%劉葒%高隆英%史秀傑%鄭曉聰%何俊彊%盧體康
란문승%류홍%고륭영%사수걸%정효총%하준강%로체강
糖蛋白%表达%鲤春病毒血症病毒
糖蛋白%錶達%鯉春病毒血癥病毒
당단백%표체%리춘병독혈증병독
本研究从鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)SVCV-741毒株克隆鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因(svc-g),将svc-g亚克隆到原核表达栽体pET-28a,转化大肠杆菌E.coli BL-21(DE3)后,用IPTG诱导培养,获得茵体总蛋白.用SVCV毒株免疫山羊所得到的抗血清作为一抗进行免疫印迹实验,结果在硝酸纤维素滤膜上检测到50～71 kDa之间的特异性免疫条带,与SVCV糖蛋白预测分子量一致,研究证明了工程茵表达获得的重组蛋白具有与SVCV毒株相同的免疫原性,也证明了该蛋白的糖基化对其免疫表位是非必需的.本研究进一步通过发酵基因工程茵和蛋白质纯化过程,获得大量的鲤春病毒血症病毒糖蛋白,为后期免疫动物获得抗血清储备了原料,也为SVCV的免疫学检测方法的建立奠定了物质基础.
本研究從鯉春病毒血癥病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)SVCV-741毒株剋隆鯉春病毒血癥病毒糖蛋白基因(svc-g),將svc-g亞剋隆到原覈錶達栽體pET-28a,轉化大腸桿菌E.coli BL-21(DE3)後,用IPTG誘導培養,穫得茵體總蛋白.用SVCV毒株免疫山羊所得到的抗血清作為一抗進行免疫印跡實驗,結果在硝痠纖維素濾膜上檢測到50～71 kDa之間的特異性免疫條帶,與SVCV糖蛋白預測分子量一緻,研究證明瞭工程茵錶達穫得的重組蛋白具有與SVCV毒株相同的免疫原性,也證明瞭該蛋白的糖基化對其免疫錶位是非必需的.本研究進一步通過髮酵基因工程茵和蛋白質純化過程,穫得大量的鯉春病毒血癥病毒糖蛋白,為後期免疫動物穫得抗血清儲備瞭原料,也為SVCV的免疫學檢測方法的建立奠定瞭物質基礎.
본연구종리춘병독혈증병독(Spring viremia of carp virus,SVCV)SVCV-741독주극륭리춘병독혈증병독당단백기인(svc-g),장svc-g아극륭도원핵표체재체pET-28a,전화대장간균E.coli BL-21(DE3)후,용IPTG유도배양,획득인체총단백.용SVCV독주면역산양소득도적항혈청작위일항진행면역인적실험,결과재초산섬유소려막상검측도50～71 kDa지간적특이성면역조대,여SVCV당단백예측분자량일치,연구증명료공정인표체획득적중조단백구유여SVCV독주상동적면역원성,야증명료해단백적당기화대기면역표위시비필수적.본연구진일보통과발효기인공정인화단백질순화과정,획득대량적리춘병독혈증병독당단백,위후기면역동물획득항혈청저비료원료,야위SVCV적면역학검측방법적건립전정료물질기출.
