现代实用医学
現代實用醫學
현대실용의학
MODERN PRACTICAL MEDICINE
2011年
11期
1214-1216,1219
,共4页
严泽军%程跃%蒋军辉%胡嘉盛%施小东%黄坚成
嚴澤軍%程躍%蔣軍輝%鬍嘉盛%施小東%黃堅成
엄택군%정약%장군휘%호가성%시소동%황견성
Survivin%启动子%膀胱肿瘤%基因治疗
Survivin%啟動子%膀胱腫瘤%基因治療
Survivin%계동자%방광종류%기인치료
目的 克隆Survivin启动子的有效片段,并检测其在人膀胱癌细胞株BIU87和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的转录活性.方法 用PCR扩增Survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3BSurvivin重组质粒,用脂质体法瞬时转染BIU87及SV-HUC-1中,检测Survivin启动子在细胞中的转录活性.同时构建含CMV启动子的pGL3BCMV重组质粒作为阳性对照.48h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性.结果 成功克隆440 bp的Survivin基因启动子,并构建了携带有Survivin基因启动子的pGL3Basic真核表达载体,转染BIU87细胞后的荧光素酶活性为2 286.98±440.21,而SV-HUC-1荧光素酶活性为12.32±1.16,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 本实验成功克隆的Survivin启动子在BIU87细胞中表现出较高的肿瘤特异性活性,其有可能作为调控元件用于膀胱癌的靶向性基因治疗.
目的 剋隆Survivin啟動子的有效片段,併檢測其在人膀胱癌細胞株BIU87和人正常膀胱上皮細胞SV-HUC-1中的轉錄活性.方法 用PCR擴增Survivin基因的啟動子片段,剋隆入熒光素酶報告質粒pGL3-Basic,構建pGL3BSurvivin重組質粒,用脂質體法瞬時轉染BIU87及SV-HUC-1中,檢測Survivin啟動子在細胞中的轉錄活性.同時構建含CMV啟動子的pGL3BCMV重組質粒作為暘性對照.48h後收集轉染細胞與熒光素酶底物反應,檢測熒光素酶活性.結果 成功剋隆440 bp的Survivin基因啟動子,併構建瞭攜帶有Survivin基因啟動子的pGL3Basic真覈錶達載體,轉染BIU87細胞後的熒光素酶活性為2 286.98±440.21,而SV-HUC-1熒光素酶活性為12.32±1.16,兩者差異有統計學意義(P＜0.01).結論 本實驗成功剋隆的Survivin啟動子在BIU87細胞中錶現齣較高的腫瘤特異性活性,其有可能作為調控元件用于膀胱癌的靶嚮性基因治療.
목적 극륭Survivin계동자적유효편단,병검측기재인방광암세포주BIU87화인정상방광상피세포SV-HUC-1중적전록활성.방법 용PCR확증Survivin기인적계동자편단,극륭입형광소매보고질립pGL3-Basic,구건pGL3BSurvivin중조질립,용지질체법순시전염BIU87급SV-HUC-1중,검측Survivin계동자재세포중적전록활성.동시구건함CMV계동자적pGL3BCMV중조질립작위양성대조.48h후수집전염세포여형광소매저물반응,검측형광소매활성.결과 성공극륭440 bp적Survivin기인계동자,병구건료휴대유Survivin기인계동자적pGL3Basic진핵표체재체,전염BIU87세포후적형광소매활성위2 286.98±440.21,이SV-HUC-1형광소매활성위12.32±1.16,량자차이유통계학의의(P＜0.01).결론 본실험성공극륭적Survivin계동자재BIU87세포중표현출교고적종류특이성활성,기유가능작위조공원건용우방광암적파향성기인치료.
