大连工业大学学报
大連工業大學學報
대련공업대학학보
JOURNAL OF DALIAN POLYTECHNIC UNIVERSITY
2012年
2期
83-87
,共5页
程菁恒%朱蓓薇%吴海涛%孙进健
程菁恆%硃蓓薇%吳海濤%孫進健
정정항%주배미%오해도%손진건
海参肠%碱性磷酸酶(ALP)%提取
海參腸%堿性燐痠酶(ALP)%提取
해삼장%감성린산매(ALP)%제취
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程.本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性.经含有0.2％Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70％硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32％.ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0～12.0稳定性较好；最适反应温度为45℃,在20～45℃具有很高的稳定性.金属离子Mg2+(1～30 mmol/L)、Zn2+ (＜10 mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用；Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+ (10 mmol/L)可明显抑制该酶活力.EDTA-Na2、DTT、Na2 WO4及Na2 HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2＞DTT＞Na2 WO4＞Na2 HPO4.
堿性燐痠酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的燐痠酶之一,在生物體內直接參與燐痠基糰的轉移和代謝過程.本文研究瞭海參腸堿性燐痠酶粗酶的提取,併分析瞭其酶學特性.經含有0.2％Triton X-100的Tris-HCl緩遲液(pH 8.9)浸提、正丁醇處理、70％硫痠銨沉澱和超濾等步驟穫得海參腸ALP粗酶,純化倍數達到2.74倍,得率為63.32％.ALP粗酶的最適反應pH為11.0,在pH 10.0～12.0穩定性較好；最適反應溫度為45℃,在20～45℃具有很高的穩定性.金屬離子Mg2+(1～30 mmol/L)、Zn2+ (＜10 mmol/L)對海參腸ALP粗酶具有顯著的激活作用；Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+ (10 mmol/L)可明顯抑製該酶活力.EDTA-Na2、DTT、Na2 WO4及Na2 HPO4對海參腸ALP粗酶有明顯的抑製作用,抑製程度依次為:EDTA-Na2＞DTT＞Na2 WO4＞Na2 HPO4.
감성린산매(Alkaline phosphatase,ALP)시최중요적린산매지일,재생물체내직접삼여린산기단적전이화대사과정.본문연구료해삼장감성린산매조매적제취,병분석료기매학특성.경함유0.2％Triton X-100적Tris-HCl완충액(pH 8.9)침제、정정순처리、70％류산안침정화초려등보취획득해삼장ALP조매,순화배수체도2.74배,득솔위63.32％.ALP조매적최괄반응pH위11.0,재pH 10.0～12.0은정성교호；최괄반응온도위45℃,재20～45℃구유흔고적은정성.금속리자Mg2+(1～30 mmol/L)、Zn2+ (＜10 mmol/L)대해삼장ALP조매구유현저적격활작용；Fe3+、Fe2+、Cu2+화Mn2+ (10 mmol/L)가명현억제해매활력.EDTA-Na2、DTT、Na2 WO4급Na2 HPO4대해삼장ALP조매유명현적억제작용,억제정도의차위:EDTA-Na2＞DTT＞Na2 WO4＞Na2 HPO4.
