药物不良反应杂志
藥物不良反應雜誌
약물불량반응잡지
ADVERSE DRUG REACTIONS JOURNAL
2009年
2期
91-95
,共5页
贾珍容%邱银生%王大菊%王程
賈珍容%邱銀生%王大菊%王程
가진용%구은생%왕대국%왕정
齐多夫定%大鼠%肝细胞%原代培养%细胞毒性
齊多伕定%大鼠%肝細胞%原代培養%細胞毒性
제다부정%대서%간세포%원대배양%세포독성
目的: 研究齐多夫定对原代大鼠肝细胞的毒性.方法:采用二步灌流法分离Wistar大鼠肝细胞,经台盼蓝拒染试验测定细胞活力,活力＞85%用于实验.实验分4组:药物组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组.肝细胞悬液(3×105个/ml)接种于各培养板:96孔板每孔200 μl,24孔板每孔1 ml,6孔板每孔2.5 ml,各板置37℃、5%二氧化碳培养箱培养4 h,弃上清液.药物组分别加入齐多夫定10、5、3.3、2、0.4、0.08mmol/L,阳性对照组分别加入四氯化碳10、2、0.5 mmol/L,阴性对照组加入含1%二甲基亚砜(DMSO)的DMEM培养液,空白对照组加入DMEM培养液.96孔板于加样后6、12、24 h进行MTT试验测定细胞活性,24孔板于加样后6、12 h测定肝细胞AST、ALT及LDH的释放量,6孔板加样后12 h将细胞苏木素-伊红(HE)染色,观察细胞形态.结果:齐多夫定浓度为3.3 mmol/L、四氯化碳浓度为2 mmol/L时,于6、12、24 h的吸光度(OD)值分别为(1.20±0.17)、(0.99±0.08)和(0.89±0.09)与(1.20±0.13)、(1.01±0.09)和(0.88±0.13),同时间点阴性对照组OD值分别为(1.34±0.08)、(1.11±0.10)和(1.03±0.11).与阴性对照组比较,齐多夫定组、四氯化碳组的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05),但10 mmol/L 齐多夫定对细胞活性的影响远低于10 mmol/L 四氯化碳.加3.3 mmol/L齐多夫定后6和12 h,AST释放量为(18.53±2.02) 卡门单位和(26.86±2.61) 卡门单位,ALT的释放量为(15.16±2.18)卡门单位和(27.48±2.27)卡门单位,LDH释放量为(1 681.00±193.98) U/L和(2 708.55±78.73)U/L;阴性对照组同时间点AST释放量为(15.91±1.62)卡门单位和(37.71±2.54) 卡门单位,ALT释放量为(19.66±0.74)卡门单位和(23.42±1.46)卡门单位,LDH释放量为(2 036.39±134.56) U/L和(2 870.21±87.73) U/L;与阴性对照组比较,齐多夫定对AST、ALT及LDH的释放量均有显著影响,差异均有统计学意义(均P＜0.05).齐多夫定浓度≥3.3 mmol/L时,可引起细胞膜破裂、核浓缩,四氯化碳浓度为10 mmol/L时,可使细胞变小、细胞膜破裂及核碎裂.结论:齐多夫定浓度≥3.3 mmol/L时,具有肝细胞毒性作用,齐多夫定的细胞毒性低于四氯化碳.
目的: 研究齊多伕定對原代大鼠肝細胞的毒性.方法:採用二步灌流法分離Wistar大鼠肝細胞,經檯盼藍拒染試驗測定細胞活力,活力＞85%用于實驗.實驗分4組:藥物組、暘性對照組、陰性對照組和空白對照組.肝細胞懸液(3×105箇/ml)接種于各培養闆:96孔闆每孔200 μl,24孔闆每孔1 ml,6孔闆每孔2.5 ml,各闆置37℃、5%二氧化碳培養箱培養4 h,棄上清液.藥物組分彆加入齊多伕定10、5、3.3、2、0.4、0.08mmol/L,暘性對照組分彆加入四氯化碳10、2、0.5 mmol/L,陰性對照組加入含1%二甲基亞砜(DMSO)的DMEM培養液,空白對照組加入DMEM培養液.96孔闆于加樣後6、12、24 h進行MTT試驗測定細胞活性,24孔闆于加樣後6、12 h測定肝細胞AST、ALT及LDH的釋放量,6孔闆加樣後12 h將細胞囌木素-伊紅(HE)染色,觀察細胞形態.結果:齊多伕定濃度為3.3 mmol/L、四氯化碳濃度為2 mmol/L時,于6、12、24 h的吸光度(OD)值分彆為(1.20±0.17)、(0.99±0.08)和(0.89±0.09)與(1.20±0.13)、(1.01±0.09)和(0.88±0.13),同時間點陰性對照組OD值分彆為(1.34±0.08)、(1.11±0.10)和(1.03±0.11).與陰性對照組比較,齊多伕定組、四氯化碳組的細胞活力均顯著降低,差異均有統計學意義(均P＜0.05),但10 mmol/L 齊多伕定對細胞活性的影響遠低于10 mmol/L 四氯化碳.加3.3 mmol/L齊多伕定後6和12 h,AST釋放量為(18.53±2.02) 卡門單位和(26.86±2.61) 卡門單位,ALT的釋放量為(15.16±2.18)卡門單位和(27.48±2.27)卡門單位,LDH釋放量為(1 681.00±193.98) U/L和(2 708.55±78.73)U/L;陰性對照組同時間點AST釋放量為(15.91±1.62)卡門單位和(37.71±2.54) 卡門單位,ALT釋放量為(19.66±0.74)卡門單位和(23.42±1.46)卡門單位,LDH釋放量為(2 036.39±134.56) U/L和(2 870.21±87.73) U/L;與陰性對照組比較,齊多伕定對AST、ALT及LDH的釋放量均有顯著影響,差異均有統計學意義(均P＜0.05).齊多伕定濃度≥3.3 mmol/L時,可引起細胞膜破裂、覈濃縮,四氯化碳濃度為10 mmol/L時,可使細胞變小、細胞膜破裂及覈碎裂.結論:齊多伕定濃度≥3.3 mmol/L時,具有肝細胞毒性作用,齊多伕定的細胞毒性低于四氯化碳.
목적: 연구제다부정대원대대서간세포적독성.방법:채용이보관류법분리Wistar대서간세포,경태반람거염시험측정세포활력,활력＞85%용우실험.실험분4조:약물조、양성대조조、음성대조조화공백대조조.간세포현액(3×105개/ml)접충우각배양판:96공판매공200 μl,24공판매공1 ml,6공판매공2.5 ml,각판치37℃、5%이양화탄배양상배양4 h,기상청액.약물조분별가입제다부정10、5、3.3、2、0.4、0.08mmol/L,양성대조조분별가입사록화탄10、2、0.5 mmol/L,음성대조조가입함1%이갑기아풍(DMSO)적DMEM배양액,공백대조조가입DMEM배양액.96공판우가양후6、12、24 h진행MTT시험측정세포활성,24공판우가양후6、12 h측정간세포AST、ALT급LDH적석방량,6공판가양후12 h장세포소목소-이홍(HE)염색,관찰세포형태.결과:제다부정농도위3.3 mmol/L、사록화탄농도위2 mmol/L시,우6、12、24 h적흡광도(OD)치분별위(1.20±0.17)、(0.99±0.08)화(0.89±0.09)여(1.20±0.13)、(1.01±0.09)화(0.88±0.13),동시간점음성대조조OD치분별위(1.34±0.08)、(1.11±0.10)화(1.03±0.11).여음성대조조비교,제다부정조、사록화탄조적세포활력균현저강저,차이균유통계학의의(균P＜0.05),단10 mmol/L 제다부정대세포활성적영향원저우10 mmol/L 사록화탄.가3.3 mmol/L제다부정후6화12 h,AST석방량위(18.53±2.02) 잡문단위화(26.86±2.61) 잡문단위,ALT적석방량위(15.16±2.18)잡문단위화(27.48±2.27)잡문단위,LDH석방량위(1 681.00±193.98) U/L화(2 708.55±78.73)U/L;음성대조조동시간점AST석방량위(15.91±1.62)잡문단위화(37.71±2.54) 잡문단위,ALT석방량위(19.66±0.74)잡문단위화(23.42±1.46)잡문단위,LDH석방량위(2 036.39±134.56) U/L화(2 870.21±87.73) U/L;여음성대조조비교,제다부정대AST、ALT급LDH적석방량균유현저영향,차이균유통계학의의(균P＜0.05).제다부정농도≥3.3 mmol/L시,가인기세포막파렬、핵농축,사록화탄농도위10 mmol/L시,가사세포변소、세포막파렬급핵쇄렬.결론:제다부정농도≥3.3 mmol/L시,구유간세포독성작용,제다부정적세포독성저우사록화탄.
