中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
12期
1145-1149
,共5页
韩小艳%赵娜%高志云%揣侠%羡鲜%蓝佳明%张永红%王永祥
韓小豔%趙娜%高誌雲%揣俠%羨鮮%藍佳明%張永紅%王永祥
한소염%조나%고지운%췌협%이선%람가명%장영홍%왕영상
柯萨奇病毒B3%巨噬细胞源趋化因子%接头%基因疫苗
柯薩奇病毒B3%巨噬細胞源趨化因子%接頭%基因疫苗
가살기병독B3%거서세포원추화인자%접두%기인역묘
目的 构建表达不同接头(linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗,观察接头长度对融合基因疫苗免疫效果的影响.方法 构建表达接头长度分别为10、15和19个氨基酸的重组质粒pcDNA3/MDC-L-VP1;将6～8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为A～E5组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VPl、peDNA3/MDC-L15-VP1和peDNA3/MDC-L19VP1,每次接种100μg/只,4周注射1次,共3次,每次免疫后第14天眼眶静脉采血,用微量中和试验滴定血清中和抗体效价.第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,制备脾细胞,用CCK-8法检测特异性CTL杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血中病毒滴度.结果 成功构建了3种不同接头长度的质粒;第3次免疫后,E组中和抗体滴度和小鼠脾淋巴细胞特异性CTL杀伤活性显著高于其他各组,血中病毒滴度显著低于其他各组(P＜0.01).结论 融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能诱导小鼠对CVB3VP1产生较强的体液和细胞免疫,有效地抑制了病毒的增殖.
目的 構建錶達不同接頭(linker)長度的巨噬細胞源趨化因子(MDC)與CVB3VP1融閤基因疫苗,觀察接頭長度對融閤基因疫苗免疫效果的影響.方法 構建錶達接頭長度分彆為10、15和19箇氨基痠的重組質粒pcDNA3/MDC-L-VP1;將6～8週齡雄性BALB/c小鼠隨機分為A～E5組,分彆肌肉註射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VPl、peDNA3/MDC-L15-VP1和peDNA3/MDC-L19VP1,每次接種100μg/隻,4週註射1次,共3次,每次免疫後第14天眼眶靜脈採血,用微量中和試驗滴定血清中和抗體效價.第3次免疫後3週,每組取3隻小鼠,製備脾細胞,用CCK-8法檢測特異性CTL殺傷活性;每組取3隻小鼠以3LD50CVB3病毒攻擊,第7天取血處死,檢測血中病毒滴度.結果 成功構建瞭3種不同接頭長度的質粒;第3次免疫後,E組中和抗體滴度和小鼠脾淋巴細胞特異性CTL殺傷活性顯著高于其他各組,血中病毒滴度顯著低于其他各組(P＜0.01).結論 融閤基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能誘導小鼠對CVB3VP1產生較彊的體液和細胞免疫,有效地抑製瞭病毒的增殖.
목적 구건표체불동접두(linker)장도적거서세포원추화인자(MDC)여CVB3VP1융합기인역묘,관찰접두장도대융합기인역묘면역효과적영향.방법 구건표체접두장도분별위10、15화19개안기산적중조질립pcDNA3/MDC-L-VP1;장6～8주령웅성BALB/c소서수궤분위A～E5조,분별기육주사pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VPl、peDNA3/MDC-L15-VP1화peDNA3/MDC-L19VP1,매차접충100μg/지,4주주사1차,공3차,매차면역후제14천안광정맥채혈,용미량중화시험적정혈청중화항체효개.제3차면역후3주,매조취3지소서,제비비세포,용CCK-8법검측특이성CTL살상활성;매조취3지소서이3LD50CVB3병독공격,제7천취혈처사,검측혈중병독적도.결과 성공구건료3충불동접두장도적질립;제3차면역후,E조중화항체적도화소서비림파세포특이성CTL살상활성현저고우기타각조,혈중병독적도현저저우기타각조(P＜0.01).결론 융합기인역묘pcDNA3/MDC-L19-VP1능유도소서대CVB3VP1산생교강적체액화세포면역,유효지억제료병독적증식.
