肝脏
肝髒
간장
CHINESE HEPATOLOGY
2005年
4期
281-283
,共3页
李光明%谢青%李定国%刘海防%徐芹芳%金由辛
李光明%謝青%李定國%劉海防%徐芹芳%金由辛
리광명%사청%리정국%류해방%서근방%금유신
小分子干扰RNA%结缔组织生长因子%肝纤维化%肝星状细胞
小分子榦擾RNA%結締組織生長因子%肝纖維化%肝星狀細胞
소분자간우RNA%결체조직생장인자%간섬유화%간성상세포
目的研究化学合成小分子干扰RNA(siRNA)对大鼠原代肝星状细胞(HSC)结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的阻抑作用及对HSC培养激活的影响.方法以胶原酶原位灌注消化加密度梯度离心法分离大鼠原代HSC,将siRNA以脂质体包裹,转染培养72 h的原代HSC,设空白对照,收集孵育96 h细胞,以Western blot和免疫细胞化学染色法检测原代HSC CTGF及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因表达.结果转染siRNA的原代HSC CTGF及α-SMA基因表达显著下调,与对照相比,CTGF蛋白下调(92±5)%(P＜0.01);α-SMA蛋白表达分别下调(62±9)%(P＜0.01,Westem blot方法)和(58±6)%(P＜0.01,免疫细胞化学染色法).结论siRNA能显著下调大鼠原代HSC CTGF基因表达,明显阻抑原代HSC培养激活,提示针对CTGF基因化学合成的siRNA具有防治肝纤维化的潜力.
目的研究化學閤成小分子榦擾RNA(siRNA)對大鼠原代肝星狀細胞(HSC)結締組織生長因子(CTGF)基因錶達的阻抑作用及對HSC培養激活的影響.方法以膠原酶原位灌註消化加密度梯度離心法分離大鼠原代HSC,將siRNA以脂質體包裹,轉染培養72 h的原代HSC,設空白對照,收集孵育96 h細胞,以Western blot和免疫細胞化學染色法檢測原代HSC CTGF及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)基因錶達.結果轉染siRNA的原代HSC CTGF及α-SMA基因錶達顯著下調,與對照相比,CTGF蛋白下調(92±5)%(P＜0.01);α-SMA蛋白錶達分彆下調(62±9)%(P＜0.01,Westem blot方法)和(58±6)%(P＜0.01,免疫細胞化學染色法).結論siRNA能顯著下調大鼠原代HSC CTGF基因錶達,明顯阻抑原代HSC培養激活,提示針對CTGF基因化學閤成的siRNA具有防治肝纖維化的潛力.
목적연구화학합성소분자간우RNA(siRNA)대대서원대간성상세포(HSC)결체조직생장인자(CTGF)기인표체적조억작용급대HSC배양격활적영향.방법이효원매원위관주소화가밀도제도리심법분리대서원대HSC,장siRNA이지질체포과,전염배양72 h적원대HSC,설공백대조,수집부육96 h세포,이Western blot화면역세포화학염색법검측원대HSC CTGF급α-평활기기동단백(α-SMA)기인표체.결과전염siRNA적원대HSC CTGF급α-SMA기인표체현저하조,여대조상비,CTGF단백하조(92±5)%(P＜0.01);α-SMA단백표체분별하조(62±9)%(P＜0.01,Westem blot방법)화(58±6)%(P＜0.01,면역세포화학염색법).결론siRNA능현저하조대서원대HSC CTGF기인표체,명현조억원대HSC배양격활,제시침대CTGF기인화학합성적siRNA구유방치간섬유화적잠력.
