解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2006年
1期
62-65
,共4页
佛波酯%Ha-ras基因%Ha-ras基因启动子与结合蛋白%人胃癌细胞BGC-823%凝胶电泳移动检测%DNA免疫印迹法
彿波酯%Ha-ras基因%Ha-ras基因啟動子與結閤蛋白%人胃癌細胞BGC-823%凝膠電泳移動檢測%DNA免疫印跡法
불파지%Ha-ras기인%Ha-ras기인계동자여결합단백%인위암세포BGC-823%응효전영이동검측%DNA면역인적법
目的探讨佛波酯(PMA)对人胃癌细胞BGC-823 Ha-ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响.方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测,并应用凝胶电泳移动检测、Southwestern blotting等方法检测PMA(100 μg/L)处理BGC-823细胞72和96 h后,对Ha-ras基因表达水平、Ha-ras基因启动子活性以及对Ha-ras启动子结合蛋白的影响. 结果经PMA(100 μg/L)处理72和96 h,与未处理细胞相比,BGC-823细胞中Ha-ras基因表达显著降低,Ha-ras基因启动子活性分别被抑制65.2%和71.8%;同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低,经检测,其分子量分别约为18 kD,35 kD. 结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha-ras启动子结合蛋白活性使Ha-ras启动子活性被抑制,从而在转录水平上调节Ha-ras基因表达.
目的探討彿波酯(PMA)對人胃癌細胞BGC-823 Ha-ras基因啟動子活性及啟動子結閤蛋白活性的影響.方法通過RT-PCR和運用自行構建的真覈錶達載體prasEYFP轉染細胞進行熒光細胞檢測,併應用凝膠電泳移動檢測、Southwestern blotting等方法檢測PMA(100 μg/L)處理BGC-823細胞72和96 h後,對Ha-ras基因錶達水平、Ha-ras基因啟動子活性以及對Ha-ras啟動子結閤蛋白的影響. 結果經PMA(100 μg/L)處理72和96 h,與未處理細胞相比,BGC-823細胞中Ha-ras基因錶達顯著降低,Ha-ras基因啟動子活性分彆被抑製65.2%和71.8%;同時兩箇Ha-ras啟動子結閤蛋白活性也顯著降低,經檢測,其分子量分彆約為18 kD,35 kD. 結論PMA長期處理通過降低人胃癌細胞中Ha-ras啟動子結閤蛋白活性使Ha-ras啟動子活性被抑製,從而在轉錄水平上調節Ha-ras基因錶達.
목적탐토불파지(PMA)대인위암세포BGC-823 Ha-ras기인계동자활성급계동자결합단백활성적영향.방법통과RT-PCR화운용자행구건적진핵표체재체prasEYFP전염세포진행형광세포검측,병응용응효전영이동검측、Southwestern blotting등방법검측PMA(100 μg/L)처리BGC-823세포72화96 h후,대Ha-ras기인표체수평、Ha-ras기인계동자활성이급대Ha-ras계동자결합단백적영향. 결과경PMA(100 μg/L)처리72화96 h,여미처리세포상비,BGC-823세포중Ha-ras기인표체현저강저,Ha-ras기인계동자활성분별피억제65.2%화71.8%;동시량개Ha-ras계동자결합단백활성야현저강저,경검측,기분자량분별약위18 kD,35 kD. 결론PMA장기처리통과강저인위암세포중Ha-ras계동자결합단백활성사Ha-ras계동자활성피억제,종이재전록수평상조절Ha-ras기인표체.
