中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
2期
115-118
,共4页
刘晖%袁忠英%沈玉娟%冯耀宇%曹建平
劉暉%袁忠英%瀋玉娟%馮耀宇%曹建平
류휘%원충영%침옥연%풍요우%조건평
牛隐孢子虫%安氏隐孢子虫%18S rRNA基因%巢式 PCR-RFLP
牛隱孢子蟲%安氏隱孢子蟲%18S rRNA基因%巢式 PCR-RFLP
우은포자충%안씨은포자충%18S rRNA기인%소식 PCR-RFLP
目的 18S rRNA巢式聚合酶链反应(Nested PCR)-限制片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)鉴定上海(简称SH-BOV)和徐州(简称XZ-BOV)两株牛源隐孢子虫.方法 改良-抗酸染色确定感染隐孢子虫的上海株和徐州株牛粪,提取DNA后经18S rRNA基因巢式PCR扩增,扩增产物测序后用Blast和MEGA软件进行同源性和系统发育分析.同时扩增产物分别用SspⅠ和VspⅠ单酶切,且XZ-BOV扩增产物用DdeⅠ酶切后进行RFLP分析.结果 通过18S rRNA基因分析,SH-BOV与1株巴西牛隐孢子虫Cryptospridium bovis同源性为100%,种系发育树上两者在同一分支;XZ-BOV与安氏隐孢子虫C. andersoni同源性为99%,种系发育树上两者在同一分支.扩增产物分别用SspⅠ和VspⅠ单酶切后,可鉴别出SH-BOV为C. bovis,XZ-BOV为C. andersoni或C. muris.XZ-BOV扩增产物用DdeⅠ酶切后可鉴别出XZ-BOV为C. andersoni.结论 上海株牛源隐孢子虫(SH-BOV)鉴定为牛隐孢子虫(C. bovis),徐州株牛源隐孢子虫(XZ-BOV)鉴定为安氏隐孢子虫(C. andersoni).
目的 18S rRNA巢式聚閤酶鏈反應(Nested PCR)-限製片段長度多態性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)鑒定上海(簡稱SH-BOV)和徐州(簡稱XZ-BOV)兩株牛源隱孢子蟲.方法 改良-抗痠染色確定感染隱孢子蟲的上海株和徐州株牛糞,提取DNA後經18S rRNA基因巢式PCR擴增,擴增產物測序後用Blast和MEGA軟件進行同源性和繫統髮育分析.同時擴增產物分彆用SspⅠ和VspⅠ單酶切,且XZ-BOV擴增產物用DdeⅠ酶切後進行RFLP分析.結果 通過18S rRNA基因分析,SH-BOV與1株巴西牛隱孢子蟲Cryptospridium bovis同源性為100%,種繫髮育樹上兩者在同一分支;XZ-BOV與安氏隱孢子蟲C. andersoni同源性為99%,種繫髮育樹上兩者在同一分支.擴增產物分彆用SspⅠ和VspⅠ單酶切後,可鑒彆齣SH-BOV為C. bovis,XZ-BOV為C. andersoni或C. muris.XZ-BOV擴增產物用DdeⅠ酶切後可鑒彆齣XZ-BOV為C. andersoni.結論 上海株牛源隱孢子蟲(SH-BOV)鑒定為牛隱孢子蟲(C. bovis),徐州株牛源隱孢子蟲(XZ-BOV)鑒定為安氏隱孢子蟲(C. andersoni).
목적 18S rRNA소식취합매련반응(Nested PCR)-한제편단장도다태성(restriction fragment length polymorphism,RFLP)감정상해(간칭SH-BOV)화서주(간칭XZ-BOV)량주우원은포자충.방법 개량-항산염색학정감염은포자충적상해주화서주주우분,제취DNA후경18S rRNA기인소식PCR확증,확증산물측서후용Blast화MEGA연건진행동원성화계통발육분석.동시확증산물분별용SspⅠ화VspⅠ단매절,차XZ-BOV확증산물용DdeⅠ매절후진행RFLP분석.결과 통과18S rRNA기인분석,SH-BOV여1주파서우은포자충Cryptospridium bovis동원성위100%,충계발육수상량자재동일분지;XZ-BOV여안씨은포자충C. andersoni동원성위99%,충계발육수상량자재동일분지.확증산물분별용SspⅠ화VspⅠ단매절후,가감별출SH-BOV위C. bovis,XZ-BOV위C. andersoni혹C. muris.XZ-BOV확증산물용DdeⅠ매절후가감별출XZ-BOV위C. andersoni.결론 상해주우원은포자충(SH-BOV)감정위우은포자충(C. bovis),서주주우원은포자충(XZ-BOV)감정위안씨은포자충(C. andersoni).
