中国真菌学杂志
中國真菌學雜誌
중국진균학잡지
CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
2009年
3期
134-136
,共3页
尹晓琳%杨建岭%李博%翟雪琼%马翠卿%魏林
尹曉琳%楊建嶺%李博%翟雪瓊%馬翠卿%魏林
윤효림%양건령%리박%적설경%마취경%위림
白念珠菌%甘露糖蛋白65%分泌性天冬氨酸蛋白酶2%基因%原核表达
白唸珠菌%甘露糖蛋白65%分泌性天鼕氨痠蛋白酶2%基因%原覈錶達
백념주균%감로당단백65%분비성천동안산단백매2%기인%원핵표체
目的 构建以白念珠菌基因MP65和SAP2为目的 基因的原核表达质粒,IPTG诱导其表达融合蛋白,并对其免疫原性进行分析.方法 PCR法自白念珠菌标准菌株获取MP65和SAP2基因,分别插入至原核表达载体pGEX-4T-2和pET32a中;将重组表达质粒转染感受态E.coli BL-21,经IFTG诱导表达、纯化后,SDS-PAGE和Western blot分析.结果 PCR法克隆出全长为1140 bp的MP65和1197 bp的SAP2基因,构建的原核表达质粒pGEX-4T-2-MP65及pET32a-SAP2,可分别表达出66 KD左右的GST融合蛋白和His融合蛋白.结论 成功获取了白念珠菌基因MP65和SAP2,所构建的原核表达质粒在BL-21中成功表达;两种蛋白均有免疫原性.
目的 構建以白唸珠菌基因MP65和SAP2為目的 基因的原覈錶達質粒,IPTG誘導其錶達融閤蛋白,併對其免疫原性進行分析.方法 PCR法自白唸珠菌標準菌株穫取MP65和SAP2基因,分彆插入至原覈錶達載體pGEX-4T-2和pET32a中;將重組錶達質粒轉染感受態E.coli BL-21,經IFTG誘導錶達、純化後,SDS-PAGE和Western blot分析.結果 PCR法剋隆齣全長為1140 bp的MP65和1197 bp的SAP2基因,構建的原覈錶達質粒pGEX-4T-2-MP65及pET32a-SAP2,可分彆錶達齣66 KD左右的GST融閤蛋白和His融閤蛋白.結論 成功穫取瞭白唸珠菌基因MP65和SAP2,所構建的原覈錶達質粒在BL-21中成功錶達;兩種蛋白均有免疫原性.
목적 구건이백념주균기인MP65화SAP2위목적 기인적원핵표체질립,IPTG유도기표체융합단백,병대기면역원성진행분석.방법 PCR법자백념주균표준균주획취MP65화SAP2기인,분별삽입지원핵표체재체pGEX-4T-2화pET32a중;장중조표체질립전염감수태E.coli BL-21,경IFTG유도표체、순화후,SDS-PAGE화Western blot분석.결과 PCR법극륭출전장위1140 bp적MP65화1197 bp적SAP2기인,구건적원핵표체질립pGEX-4T-2-MP65급pET32a-SAP2,가분별표체출66 KD좌우적GST융합단백화His융합단백.결론 성공획취료백념주균기인MP65화SAP2,소구건적원핵표체질립재BL-21중성공표체;량충단백균유면역원성.
