中国草地学报
中國草地學報
중국초지학보
CHINESE JOURNAL OF GRASSLAND
2010年
6期
21-26
,共6页
晁跃辉%康俊梅%王凭青%杨青川
晁躍輝%康俊梅%王憑青%楊青川
조약휘%강준매%왕빙청%양청천
紫花苜蓿%锌指蛋白%烟草%转化
紫花苜蓿%鋅指蛋白%煙草%轉化
자화목숙%자지단백%연초%전화
对紫花苜蓿一种新的CCCH类型锌指蛋白基因进行克隆及转化到烟草中,为研究该基因的功能提供依据.将紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因(EU624138)连接到载体pBI121上,构建成植物表达载体pBI-ZFN.将表达载体转化到感受态农杆菌株LBA4404中,利用农杆菌介导的方法,以烟草无菌苗叶片为外植体,转化烟草,经卡那霉素筛选获得十几个烟草再生植株.对其中四个再生植株进行PCR和Southern检测,证明目的基因已经整合到烟草基因组中,通过RT-PCR检测,初步证明目的基因在烟草中可以表达.
對紫花苜蓿一種新的CCCH類型鋅指蛋白基因進行剋隆及轉化到煙草中,為研究該基因的功能提供依據.將紫花苜蓿鋅指蛋白MsZFN基因(EU624138)連接到載體pBI121上,構建成植物錶達載體pBI-ZFN.將錶達載體轉化到感受態農桿菌株LBA4404中,利用農桿菌介導的方法,以煙草無菌苗葉片為外植體,轉化煙草,經卡那黴素篩選穫得十幾箇煙草再生植株.對其中四箇再生植株進行PCR和Southern檢測,證明目的基因已經整閤到煙草基因組中,通過RT-PCR檢測,初步證明目的基因在煙草中可以錶達.
대자화목숙일충신적CCCH류형자지단백기인진행극륭급전화도연초중,위연구해기인적공능제공의거.장자화목숙자지단백MsZFN기인(EU624138)련접도재체pBI121상,구건성식물표체재체pBI-ZFN.장표체재체전화도감수태농간균주LBA4404중,이용농간균개도적방법,이연초무균묘협편위외식체,전화연초,경잡나매소사선획득십궤개연초재생식주.대기중사개재생식주진행PCR화Southern검측,증명목적기인이경정합도연초기인조중,통과RT-PCR검측,초보증명목적기인재연초중가이표체.