CAJ | 학술논문

目的应用脂肪组织来源干细胞(ASCs)在体外构建组织工程脂肪并与已构建的复合皮组装培育,试构建出含脂肪层的组织工程化皮瓣.方法 (1)构建组织工程脂肪从脂肪组织中分离培养ASCs并进行三系分化诱导鉴定.ASCs与胶原凝胶混合并进行体外成脂诱导,诱导15d后分别进行倒置显微镜、油红O染色及HE染色观察.(2)构建复合皮从包皮组织中分离培养表皮细胞(Kc)和成纤维细胞(Fb).Fb与胶原凝胶混合后培养5d,将Kc接种到含有Fb的凝胶表面,在液面下培养4d后移至气-液界面继续培养10d形成复合皮.(3)构建含皮下脂肪组织的3层结构的皮肤复合组织将培养的复合皮与脂肪组织按正常皮肤结构顺序组装后继续培养3d并行HE染色观察.结果 (1)ASCs具有成脂、成软骨和成骨分化能力.ASCs凝胶复合物体外成脂诱导15d后,可见细胞内充满圆形脂滴,呈单房或多房形,油红O染色及HE染色均显示为成熟脂滴.(2)经过气-液界面培养后,Kc成层分化,形成基底上层.(3)组装培育后的皮肤复合组织分3层,表层Kc成层分化并形成基底上层；中层和底层连接处细胞聚集；成脂分化的ASCs位于底层.结论分别应用Kc、Fb和ASCs三种细胞,在体外构建出组织工程化脂肪和复合皮,且按序组装培育,可构建出组织工程化皮瓣.
목적 응용지방조직래원간세포(ASCs)재체외구건조직공정지방병여이구건적복합피조장배육,시구건출함지방층적조직공정화피판.방법 (1)구건조직공정지방종지방조직중분리배양ASCs병진행삼계분화유도감정.ASCs여효원응효혼합병진행체외성지유도,유도15d후분별진행도치현미경、유홍O염색급HE염색관찰.(2)구건복합피종포피조직중분리배양표피세포(Kc)화성섬유세포(Fb).Fb여효원응효혼합후배양5d,장Kc접충도함유Fb적응효표면,재액면하배양4d후이지기-액계면계속배양10d형성복합피.(3)구건함피하지방조직적3층결구적피부복합조직장배양적복합피여지방조직안정상피부결구순서조장후계속배양3d병행HE염색관찰.결과 (1)ASCs구유성지、성연골화성골분화능력.ASCs응효복합물체외성지유도15d후,가견세포내충만원형지적,정단방혹다방형,유홍O염색급HE염색균현시위성숙지적.(2)경과기-액계면배양후,Kc성층분화,형성기저상층.(3)조장배육후적피부복합조직분3층,표층Kc성층분화병형성기저상층；중층화저층련접처세포취집；성지분화적ASCs위우저층.결론 분별응용Kc、Fb화ASCs삼충세포,재체외구건출조직공정화지방화복합피,차안서조장배육,가구건출조직공정화피판.