首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2012年
3期
285-290
,共6页
赵晖%王义周%寇爽%李明%齐放%张秋霞%王蕾
趙暉%王義週%寇爽%李明%齊放%張鞦霞%王蕾
조휘%왕의주%구상%리명%제방%장추하%왕뢰
实验性自身免疫性脑脊髓炎%髓鞘碱性蛋白%轴突损伤修复及其机制
實驗性自身免疫性腦脊髓炎%髓鞘堿性蛋白%軸突損傷脩複及其機製
실험성자신면역성뇌척수염%수초감성단백%축돌손상수복급기궤제
目的 观察髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)68-86 及MBP87-99诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠模型中淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)及生长相关蛋白(growth-associated protein,GAP)-43mRNA表达及其环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)-蛋白激酶(protein kinase,PKA)的变化,探讨EAE大鼠发病过程中轴突损伤修复及其可能的分子机制.方法 应用不同肽段的MBP 68-86或MBP87-99与不完全福氏佐剂及结核杆菌混合制成抗原,皮下注射于大鼠双后足垫,建立大鼠EAE模型.观察其神经功能评分、脑组织病理变化,酶联免疫测定大鼠脑组织cAMP含量,实时荧光定量RT-PCR法测定大鼠脑组织APP、GAP-43及PKA mRNA表达.结果 与MBP87-99组大鼠比较,MBP68-86所致EAE病情进展快,神经功能评分较高,炎细胞浸润重并形成袖套状改变.中剂量MBP68-86免疫大鼠第14天,脑组织GAP-43 mRNA表达较正常组明显降低(P<0.05);第28天,APP mRNA表达明显升高(P<0.05).MBP87-99免疫大鼠第28天,APP mRNA表达较正常组和小剂量MBP68-86明显上升(P<0.05);GAP-43 mRNA表达较大、小剂量MBP68-86明显升高(P<0.05).大、小剂量MBP68-86与MBP87-99免疫大鼠第28天,脑组织cAMP水平均较正常组明显增高(P<0.01或P<0.05),中剂量MBP68-86与MBP87-99组大鼠脑组织PKA mRNA表达明显升高(P<0.01).结论 MBP68-86或MBP87-99均可诱导Lewis大鼠产生EAE.可引起脑组织的炎性细胞浸润、脱髓鞘及轴突损伤等,且损伤有一定的自我修复功能,其机制可能与调节cAMP-PKA 信号途径有关.综合分析研究结果发现,MBP68-86中剂量(每只50 μg)可作为探索EAE发病特点及药物观察的实验模型.
目的 觀察髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)68-86 及MBP87-99誘導實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠模型中澱粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein,APP)及生長相關蛋白(growth-associated protein,GAP)-43mRNA錶達及其環燐痠腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)-蛋白激酶(protein kinase,PKA)的變化,探討EAE大鼠髮病過程中軸突損傷脩複及其可能的分子機製.方法 應用不同肽段的MBP 68-86或MBP87-99與不完全福氏佐劑及結覈桿菌混閤製成抗原,皮下註射于大鼠雙後足墊,建立大鼠EAE模型.觀察其神經功能評分、腦組織病理變化,酶聯免疫測定大鼠腦組織cAMP含量,實時熒光定量RT-PCR法測定大鼠腦組織APP、GAP-43及PKA mRNA錶達.結果 與MBP87-99組大鼠比較,MBP68-86所緻EAE病情進展快,神經功能評分較高,炎細胞浸潤重併形成袖套狀改變.中劑量MBP68-86免疫大鼠第14天,腦組織GAP-43 mRNA錶達較正常組明顯降低(P<0.05);第28天,APP mRNA錶達明顯升高(P<0.05).MBP87-99免疫大鼠第28天,APP mRNA錶達較正常組和小劑量MBP68-86明顯上升(P<0.05);GAP-43 mRNA錶達較大、小劑量MBP68-86明顯升高(P<0.05).大、小劑量MBP68-86與MBP87-99免疫大鼠第28天,腦組織cAMP水平均較正常組明顯增高(P<0.01或P<0.05),中劑量MBP68-86與MBP87-99組大鼠腦組織PKA mRNA錶達明顯升高(P<0.01).結論 MBP68-86或MBP87-99均可誘導Lewis大鼠產生EAE.可引起腦組織的炎性細胞浸潤、脫髓鞘及軸突損傷等,且損傷有一定的自我脩複功能,其機製可能與調節cAMP-PKA 信號途徑有關.綜閤分析研究結果髮現,MBP68-86中劑量(每隻50 μg)可作為探索EAE髮病特點及藥物觀察的實驗模型.
목적 관찰수초감성단백(myelin basic protein,MBP)68-86 급MBP87-99유도실험성자신면역성뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)대서모형중정분양전체단백(amyloid precursor protein,APP)급생장상관단백(growth-associated protein,GAP)-43mRNA표체급기배린산선감(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)-단백격매(protein kinase,PKA)적변화,탐토EAE대서발병과정중축돌손상수복급기가능적분자궤제.방법 응용불동태단적MBP 68-86혹MBP87-99여불완전복씨좌제급결핵간균혼합제성항원,피하주사우대서쌍후족점,건립대서EAE모형.관찰기신경공능평분、뇌조직병리변화,매련면역측정대서뇌조직cAMP함량,실시형광정량RT-PCR법측정대서뇌조직APP、GAP-43급PKA mRNA표체.결과 여MBP87-99조대서비교,MBP68-86소치EAE병정진전쾌,신경공능평분교고,염세포침윤중병형성수투상개변.중제량MBP68-86면역대서제14천,뇌조직GAP-43 mRNA표체교정상조명현강저(P<0.05);제28천,APP mRNA표체명현승고(P<0.05).MBP87-99면역대서제28천,APP mRNA표체교정상조화소제량MBP68-86명현상승(P<0.05);GAP-43 mRNA표체교대、소제량MBP68-86명현승고(P<0.05).대、소제량MBP68-86여MBP87-99면역대서제28천,뇌조직cAMP수평균교정상조명현증고(P<0.01혹P<0.05),중제량MBP68-86여MBP87-99조대서뇌조직PKA mRNA표체명현승고(P<0.01).결론 MBP68-86혹MBP87-99균가유도Lewis대서산생EAE.가인기뇌조직적염성세포침윤、탈수초급축돌손상등,차손상유일정적자아수복공능,기궤제가능여조절cAMP-PKA 신호도경유관.종합분석연구결과발현,MBP68-86중제량(매지50 μg)가작위탐색EAE발병특점급약물관찰적실험모형.
