医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2005年
6期
403-408
,共6页
孔景临%杜秀宝%范崇旭%张金平%刘石磊
孔景臨%杜秀寶%範崇旭%張金平%劉石磊
공경림%두수보%범숭욱%장금평%류석뢰
槲寄生蛋白%分离纯化%克隆
槲寄生蛋白%分離純化%剋隆
곡기생단백%분리순화%극륭
目的克隆槲寄生蛋白具有N-糖苷酶活性的毒性A链.方法利用硫酸铵沉淀、亲和色谱和离子交换色谱法,从吉林产槲寄生[Viscum coloratum(Komar.)Nakai]中提取、分离、纯化其中具有半乳糖结合活性的蛋白质成分.采用SDS-PAGE分析纯化的蛋白样品,蛋白条带转印至PVDF膜后,Edman降解法测定肽链的N端序列.由测序结果设计引物,利用RT-PCR方法克隆一种蛋白A链的基因.结果从槲寄生中纯化出两种高毒性的蛋白质新成分CM-1、CM-2,其中CM-1 A链被克隆并测序,其与白果槲寄生蛋白A链的同源性较高.结论一种新槲寄生蛋白A链的基因被成功克隆.
目的剋隆槲寄生蛋白具有N-糖苷酶活性的毒性A鏈.方法利用硫痠銨沉澱、親和色譜和離子交換色譜法,從吉林產槲寄生[Viscum coloratum(Komar.)Nakai]中提取、分離、純化其中具有半乳糖結閤活性的蛋白質成分.採用SDS-PAGE分析純化的蛋白樣品,蛋白條帶轉印至PVDF膜後,Edman降解法測定肽鏈的N耑序列.由測序結果設計引物,利用RT-PCR方法剋隆一種蛋白A鏈的基因.結果從槲寄生中純化齣兩種高毒性的蛋白質新成分CM-1、CM-2,其中CM-1 A鏈被剋隆併測序,其與白果槲寄生蛋白A鏈的同源性較高.結論一種新槲寄生蛋白A鏈的基因被成功剋隆.
목적극륭곡기생단백구유N-당감매활성적독성A련.방법이용류산안침정、친화색보화리자교환색보법,종길림산곡기생[Viscum coloratum(Komar.)Nakai]중제취、분리、순화기중구유반유당결합활성적단백질성분.채용SDS-PAGE분석순화적단백양품,단백조대전인지PVDF막후,Edman강해법측정태련적N단서렬.유측서결과설계인물,이용RT-PCR방법극륭일충단백A련적기인.결과종곡기생중순화출량충고독성적단백질신성분CM-1、CM-2,기중CM-1 A련피극륭병측서,기여백과곡기생단백A련적동원성교고.결론일충신곡기생단백A련적기인피성공극륭.
