细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
1期
54-57
,共4页
陈玉珍%何韶衡%周艳春%黄阗%刘岳宁%陈霖霏
陳玉珍%何韶衡%週豔春%黃闐%劉嶽寧%陳霖霏
진옥진%하소형%주염춘%황전%류악저%진림비
人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂%单克隆抗体%特性鉴定
人分泌性白細胞蛋白酶抑製劑%單剋隆抗體%特性鑒定
인분비성백세포단백매억제제%단극륭항체%특성감정
目的:制备抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(hSLPI)单克隆抗体(mAb).方法:以hSLPI为免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hSLPI mAb.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞术、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果:获得4株可稳定分泌抗hSLPI mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM.Western blot分析表明,此株mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为12 000.免疫组化染色表明,mAb与肺和结肠组织的上皮细胞、疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织的疑似肥大细胞的反应性均呈阳性.流式细胞术分析显示,4株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞中的SLPI均呈阳性反应.激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物主要位于A549细胞的胞质内.结论:成功地制备抗hSLPI mAb,为变态反应性疾病和炎症性疾病的研究工作提供了有用的试剂.
目的:製備抗人分泌性白細胞蛋白酶抑製劑(hSLPI)單剋隆抗體(mAb).方法:以hSLPI為免疫BALB/c小鼠,運用雜交瘤技術製備抗hSLPI mAb.採用Ig類與亞類鑒定試劑盒鑒定mAb的Ig亞類;通過ELISA、Western blot、免疫組化染色法、流式細胞術、激光共聚焦顯微鏡技術鑒定mAb的特異性.結果:穫得4株可穩定分泌抗hSLPI mAb的雜交瘤細胞,其分泌的mAb均為IgM.Western blot分析錶明,此株mAb所識彆的靶分子的相對分子質量(Mr)約為12 000.免疫組化染色錶明,mAb與肺和結腸組織的上皮細胞、疑似肥大細胞、扁桃體和包皮組織的疑似肥大細胞的反應性均呈暘性.流式細胞術分析顯示,4株mAb與人肺腺癌細胞繫A549細胞中的SLPI均呈暘性反應.激光共聚焦掃描顯微鏡觀察,熒光標記的暘性反應物主要位于A549細胞的胞質內.結論:成功地製備抗hSLPI mAb,為變態反應性疾病和炎癥性疾病的研究工作提供瞭有用的試劑.
목적:제비항인분비성백세포단백매억제제(hSLPI)단극륭항체(mAb).방법:이hSLPI위면역BALB/c소서,운용잡교류기술제비항hSLPI mAb.채용Ig류여아류감정시제합감정mAb적Ig아류;통과ELISA、Western blot、면역조화염색법、류식세포술、격광공취초현미경기술감정mAb적특이성.결과:획득4주가은정분비항hSLPI mAb적잡교류세포,기분비적mAb균위IgM.Western blot분석표명,차주mAb소식별적파분자적상대분자질량(Mr)약위12 000.면역조화염색표명,mAb여폐화결장조직적상피세포、의사비대세포、편도체화포피조직적의사비대세포적반응성균정양성.류식세포술분석현시,4주mAb여인폐선암세포계A549세포중적SLPI균정양성반응.격광공취초소묘현미경관찰,형광표기적양성반응물주요위우A549세포적포질내.결론:성공지제비항hSLPI mAb,위변태반응성질병화염증성질병적연구공작제공료유용적시제.
