第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
4期
299-302
,共4页
张艳%陈彬%李渝萍%陈健%陈敏%娄桂予%周度金
張豔%陳彬%李渝萍%陳健%陳敏%婁桂予%週度金
장염%진빈%리투평%진건%진민%루계여%주도금
PNRC%DNA甲基化%MSP%5-氮杂-2'-脱氧胞苷
PNRC%DNA甲基化%MSP%5-氮雜-2'-脫氧胞苷
PNRC%DNA갑기화%MSP%5-담잡-2'-탈양포감
目的 研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用.方法 应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用"MethPrimer"软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性.结果 PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强.结论 PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低.
目的 研究乳腺癌細胞中富含脯氨痠覈受體輔活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因啟動子CpG島的甲基化狀態及在PNRC轉錄調節中的作用.方法 應用PT-PCR檢測PNRC基因在正常乳腺細胞與乳腺癌細胞中的錶達情況,併運用"MethPrimer"軟件對PNRC啟動子區進行分析,預測CpG島,通過甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR,MSP)檢測PNRC啟動子區CpG島的甲基化狀況;PT-PCR及Northern雜交檢測乳腺癌細胞經甲基轉移酶抑製劑5-氮雜-2'-脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用後,PNRC基因mRNA的錶達情況;Westernblot檢測5-Aza-dc榦預對PNRC蛋白錶達的影響;將含PNRC啟動子序列的報告質粒轉染乳腺癌細胞,再經5-Aza-dc處理後,檢測PNRC基因啟動子的活性.結果 PNRC基因在乳腺癌細胞中的錶達較正常乳腺細胞明顯降低;乳腺癌細胞PNRC基因啟動子區存在CpG島甲基化;乳腺癌細胞經5-Aza-dc處理後,PNRC基因mRNA及蛋白錶達水平顯著增加,其PNRC基因啟動子的活性也明顯增彊.結論 PNRC基因啟動子區的高甲基化導緻PNRC在乳腺癌細胞中錶達降低.
목적 연구유선암세포중부함포안산핵수체보활화자(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)기인계동자CpG도적갑기화상태급재PNRC전록조절중적작용.방법 응용PT-PCR검측PNRC기인재정상유선세포여유선암세포중적표체정황,병운용"MethPrimer"연건대PNRC계동자구진행분석,예측CpG도,통과갑기화특이성PCR(methylation-specific PCR,MSP)검측PNRC계동자구CpG도적갑기화상황;PT-PCR급Northern잡교검측유선암세포경갑기전이매억제제5-담잡-2'-탈양포감(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dc)작용후,PNRC기인mRNA적표체정황;Westernblot검측5-Aza-dc간예대PNRC단백표체적영향;장함PNRC계동자서렬적보고질립전염유선암세포,재경5-Aza-dc처리후,검측PNRC기인계동자적활성.결과 PNRC기인재유선암세포중적표체교정상유선세포명현강저;유선암세포PNRC기인계동자구존재CpG도갑기화;유선암세포경5-Aza-dc처리후,PNRC기인mRNA급단백표체수평현저증가,기PNRC기인계동자적활성야명현증강.결론 PNRC기인계동자구적고갑기화도치PNRC재유선암세포중표체강저.
