CAJ | 학술논문

日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的筛选及阳性克隆分析
일본혈흡충동충렬해물대동방전서간장T7서균체전시cDNA문고적사선급양성극륭분석
Screening of T7 Phage-display cDNA Library from Liver of Microtus fortis with Extracts of Schistosomulum and Characterization of the Positive Clones

万方数据

生物工程学报生物工程學報 생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年 5期 733-739 ,共7页

贾人初%孙毅%刘金明%傅志强%苑纯秀%石耀军%陆珂%孙焕%李浩%金亚美%林矫矫

가인초%손의%류금명%부지강%원순수%석요군%륙가%손환%리호%금아미%림교교

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일본혈흡충%동방전서%간장%서균체전시cDNA문고%항성기인

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性.为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因, 以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针, 筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库.经三轮筛选, 特异性噬菌体得到有效富集(375倍).随机挑取92个克隆进行序列测定, 获得了19条有效EST序列.其中13个条EST序列与已知基因或表达序列标签同源, 6个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性, 为新的表达序列标签.将19个EST序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养, 其中4号(GenBank Accession No.: EW968294)、13号(GenBank Accession No.: EW968303)、14号(GenBank Accession No.: EW968304)、15号(GenBank Accession No.: EW968305)、18号(GenBank Accession No.: EW968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果.综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果, 编码CASP8和FADD类似性细胞程序性死亡调节蛋白、--2-HS-糖蛋白、M4蛋白、具有R3H结构域的一种mRNA结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因.为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础.
동방전서대혈흡충구유천연항성.위사선화분석동방전서항혈흡충항성상관기인, 이일본혈흡충동충가용성렬해물위탐침, 사선동방전서간장서균체전시cDNA문고.경삼륜사선, 특이성서균체득도유효부집(375배).수궤도취92개극륭진행서렬측정, 획득료19조유효EST서렬.기중13개조EST서렬여이지기인혹표체서렬표첨동원, 6개EST서렬여이지기인혹표체서렬표첨균무동원성, 위신적표체서렬표첨.장19개EST서렬적양성서균체극륭화혈흡충동충공배양, 기중4호(GenBank Accession No.: EW968294)、13호(GenBank Accession No.: EW968303)、14호(GenBank Accession No.: EW968304)、15호(GenBank Accession No.: EW968305)、18호(GenBank Accession No.: EW968308)극륭균유도료현저적살충효과.종합생물신식학분석결과급체외살상시험결과, 편마CASP8화FADD유사성세포정서성사망조절단백、--2-HS-당단백、M4단백、구유R3H결구역적일충mRNA결합단백이급삼충미지단백적편마기인(14、15、18호극륭)가능시동방전서항혈흡충병항성상관기인.위진일보연구동방전서항혈흡충궤리전정료기출.