细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
2期
169-171
,共3页
狂犬病毒%核蛋白基因%克隆%抗原表位
狂犬病毒%覈蛋白基因%剋隆%抗原錶位
광견병독%핵단백기인%극륭%항원표위
目的:克隆狂犬病毒ERA株核蛋白基因并对核蛋白主要抗原表位进行分析.方法:根据GenBank中已发表的RV N基因序列,设计合成了1对特异性引物,对RV ERA株N基因进行了RT-PCR扩增.将PCR产物纯化后与pMD18-T连接得到重组质粒pMD-N,并进行核苷酸序列测定.结果:该基因全长1 353 bp,编码450个氨基酸.RV ERA株与Gen-Bank中RV不同固定毒株和分离毒株N基因相比,核苷酸的同源性为98.0%～99.6%,推导的氨基酸序列的同源性为98.3%～99.60A,.核蛋白主要抗原表位分析表明,ERA株与其他固定毒株和分离毒株相比,仅在BC抗原表位(369～383位氨基酸)和Th抗原表位(394～408位氨基酸)处有1～3个氨基酸的不同,其他表位无差异.但与Iagos bat、Mokola和Duvenhage毒株相比,抗原位点氨基酸组成差异明显.结论:RV ERA株N基因可用于基因工程疫苗研制和核酸检测的靶基因;核蛋白可作为抗原用于狂犬病的检测.
目的:剋隆狂犬病毒ERA株覈蛋白基因併對覈蛋白主要抗原錶位進行分析.方法:根據GenBank中已髮錶的RV N基因序列,設計閤成瞭1對特異性引物,對RV ERA株N基因進行瞭RT-PCR擴增.將PCR產物純化後與pMD18-T連接得到重組質粒pMD-N,併進行覈苷痠序列測定.結果:該基因全長1 353 bp,編碼450箇氨基痠.RV ERA株與Gen-Bank中RV不同固定毒株和分離毒株N基因相比,覈苷痠的同源性為98.0%～99.6%,推導的氨基痠序列的同源性為98.3%～99.60A,.覈蛋白主要抗原錶位分析錶明,ERA株與其他固定毒株和分離毒株相比,僅在BC抗原錶位(369～383位氨基痠)和Th抗原錶位(394～408位氨基痠)處有1～3箇氨基痠的不同,其他錶位無差異.但與Iagos bat、Mokola和Duvenhage毒株相比,抗原位點氨基痠組成差異明顯.結論:RV ERA株N基因可用于基因工程疫苗研製和覈痠檢測的靶基因;覈蛋白可作為抗原用于狂犬病的檢測.
목적:극륭광견병독ERA주핵단백기인병대핵단백주요항원표위진행분석.방법:근거GenBank중이발표적RV N기인서렬,설계합성료1대특이성인물,대RV ERA주N기인진행료RT-PCR확증.장PCR산물순화후여pMD18-T련접득도중조질립pMD-N,병진행핵감산서렬측정.결과:해기인전장1 353 bp,편마450개안기산.RV ERA주여Gen-Bank중RV불동고정독주화분리독주N기인상비,핵감산적동원성위98.0%～99.6%,추도적안기산서렬적동원성위98.3%～99.60A,.핵단백주요항원표위분석표명,ERA주여기타고정독주화분리독주상비,부재BC항원표위(369～383위안기산)화Th항원표위(394～408위안기산)처유1～3개안기산적불동,기타표위무차이.단여Iagos bat、Mokola화Duvenhage독주상비,항원위점안기산조성차이명현.결론:RV ERA주N기인가용우기인공정역묘연제화핵산검측적파기인;핵단백가작위항원용우광견병적검측.
