CAJ | 학술논문

目的观察精原干细胞在中药生精制剂中的生长特性,为探讨精原干细胞的多向分化能力提供实验依据.方法取5～7d龄昆明系雄性小白鼠,脱颈椎处死后,无菌取出睾丸,进行精原干细胞分离、培养与鉴定.取培养3d的精原干细胞,分为对照组和实验组.对照组用DMEM/F12完全培养液(含10%FBS、4mmol/L谷氨酰胺、0.12%NaHCO3、0.5mmol/L丙酮酸钠、15mmol/L HEPES、50U/mL青霉素和50μg/mL链霉素)培养,实验组用条件培养液(DMEM/F12完全培养液中添加中药生精制剂生精胶囊浓缩液)培养.在倒置显微镜下观察细胞的形态变化,酶联吸收OD值,细胞DNA倍体分析.结果实验组精原干细胞在中药生精制剂条件培养液中较对照组细胞生长快,条件培养3～7d后见细胞生长迅速,呈集落样增长,细胞立体感增强,但未见明显细胞间桥;诱导培养15d见细胞增殖达高峰,增殖细胞的胞质间桥仍然不明显.酶联吸收OD值两组之间有显著性差异(P<0.01).细胞DNA倍体分析,实验组DNA四倍体含量与对照组比较,两组之间有显著性差异(P<0.01).结论小鼠精原干细胞在中药生精制剂培养条件下能较快速生长与增殖,在增殖过程中表现出与正常体内细胞增殖的某些特性,这为进一步研究精原干细胞多向分化潜能提供实验参考,也为中药制剂治疗少、弱精子症提供理论依据.
목적 관찰정원간세포재중약생정제제중적생장특성,위탐토정원간세포적다향분화능력제공실험의거.방법 취5～7d령곤명계웅성소백서,탈경추처사후,무균취출고환,진행정원간세포분리、배양여감정.취배양3d적정원간세포,분위대조조화실험조.대조조용DMEM/F12완전배양액(함10%FBS、4mmol/L곡안선알、0.12%NaHCO3、0.5mmol/L병동산납、15mmol/L HEPES、50U/mL청매소화50μg/mL련매소)배양,실험조용조건배양액(DMEM/F12완전배양액중첨가중약생정제제생정효낭농축액)배양.재도치현미경하관찰세포적형태변화,매련흡수OD치,세포DNA배체분석.결과 실험조정원간세포재중약생정제제조건배양액중교대조조세포생장쾌,조건배양3～7d후견세포생장신속,정집락양증장,세포입체감증강,단미견명현세포간교;유도배양15d견세포증식체고봉,증식세포적포질간교잉연불명현.매련흡수OD치량조지간유현저성차이(P<0.01).세포DNA배체분석,실험조DNA사배체함량여대조조비교,량조지간유현저성차이(P<0.01).결론 소서정원간세포재중약생정제제배양조건하능교쾌속생장여증식,재증식과정중표현출여정상체내세포증식적모사특성,저위진일보연구정원간세포다향분화잠능제공실험삼고,야위중약제제치료소、약정자증제공이론의거.