中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2009年
6期
920-927
,共8页
郝林%韩从辉%李怀富%郑小青%贡震%董秉政%范涛%詹鸣
郝林%韓從輝%李懷富%鄭小青%貢震%董秉政%範濤%詹鳴
학림%한종휘%리부부%정소청%공진%동병정%범도%첨명
膀胱肿瘤%超抗原%溶瘤病毒%葡萄球菌肠毒素A
膀胱腫瘤%超抗原%溶瘤病毒%葡萄毬菌腸毒素A
방광종류%초항원%용류병독%포도구균장독소A
目的 通过重组pSG218质粒构建携带超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因的pDC318-SEA腺病毒载体,将其扩增纯化,并探讨其潜在的靶向抗肿瘤机制.方法 通过PCR技术,从产 SEA的葡萄球菌标准菌株基因组 DNA中获得 SEA全长基因,酶切后克隆入pSG218质粒,获得重组质粒pDC318-SEA.鉴定正确后,将pDC318-SEA与病毒骨架质粒pPE3-ccdB通过脂质体共转染HEK293细胞,9～14 d出现病毒空斑.提取腺病毒的DNA,进行PCR鉴定.扩增DC318-SEA,氯化铯梯度离心纯化腺病毒,测定病毒滴度.结果 应用PCR验证、双酶切分析、序列测定表明,成功构建了pDC318-SEA质粒,通过同源重组成功获得携带超抗原SEA基因片段的DC318-SEA腺病毒.结论 获得可表达SEA基因的DC318-SEA溶瘤腺病毒载体,为进一步研究该病毒对膀胱肿瘤靶向治疗的作用奠定了基础,该病毒载体应该有巨大的、多靶向性、高效抗膀胱肿瘤作用.
目的 通過重組pSG218質粒構建攜帶超抗原葡萄毬菌腸毒素A(SEA)基因的pDC318-SEA腺病毒載體,將其擴增純化,併探討其潛在的靶嚮抗腫瘤機製.方法 通過PCR技術,從產 SEA的葡萄毬菌標準菌株基因組 DNA中穫得 SEA全長基因,酶切後剋隆入pSG218質粒,穫得重組質粒pDC318-SEA.鑒定正確後,將pDC318-SEA與病毒骨架質粒pPE3-ccdB通過脂質體共轉染HEK293細胞,9～14 d齣現病毒空斑.提取腺病毒的DNA,進行PCR鑒定.擴增DC318-SEA,氯化銫梯度離心純化腺病毒,測定病毒滴度.結果 應用PCR驗證、雙酶切分析、序列測定錶明,成功構建瞭pDC318-SEA質粒,通過同源重組成功穫得攜帶超抗原SEA基因片段的DC318-SEA腺病毒.結論 穫得可錶達SEA基因的DC318-SEA溶瘤腺病毒載體,為進一步研究該病毒對膀胱腫瘤靶嚮治療的作用奠定瞭基礎,該病毒載體應該有巨大的、多靶嚮性、高效抗膀胱腫瘤作用.
목적 통과중조pSG218질립구건휴대초항원포도구균장독소A(SEA)기인적pDC318-SEA선병독재체,장기확증순화,병탐토기잠재적파향항종류궤제.방법 통과PCR기술,종산 SEA적포도구균표준균주기인조 DNA중획득 SEA전장기인,매절후극륭입pSG218질립,획득중조질립pDC318-SEA.감정정학후,장pDC318-SEA여병독골가질립pPE3-ccdB통과지질체공전염HEK293세포,9～14 d출현병독공반.제취선병독적DNA,진행PCR감정.확증DC318-SEA,록화색제도리심순화선병독,측정병독적도.결과 응용PCR험증、쌍매절분석、서렬측정표명,성공구건료pDC318-SEA질립,통과동원중조성공획득휴대초항원SEA기인편단적DC318-SEA선병독.결론 획득가표체SEA기인적DC318-SEA용류선병독재체,위진일보연구해병독대방광종류파향치료적작용전정료기출,해병독재체응해유거대적、다파향성、고효항방광종류작용.
