临床医学工程
臨床醫學工程
림상의학공정
CLINICAL MEDICAL ENGINEERING
2012年
1期
18-21
,共4页
史仍飞%刘子青%袁海平%王顺利%魏安奎%张平
史仍飛%劉子青%袁海平%王順利%魏安奎%張平
사잉비%류자청%원해평%왕순리%위안규%장평
骨骼肌卫星细胞%机械生长因子%细胞原代培养%细胞增殖
骨骼肌衛星細胞%機械生長因子%細胞原代培養%細胞增殖
골격기위성세포%궤계생장인자%세포원대배양%세포증식
目的 骨骼肌卫星细胞是肌源性干细胞,该细胞的增殖受一系列生长因子的影响.而机械生长因子( mechano growth factor,MGF)是近年来发现的一种对力学信号敏感的自分泌局部生长因子,可以激活肌卫星细胞的增殖.本研究采用不同浓度的MGF干预体外培养的骨骼肌卫星细胞,探讨促进卫星细胞增殖的适宜浓度.方法 用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,待细胞同步化后,分别应用不同浓度的MGF(0 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml和150 ng/ml)干预原代培养的骨骼肌卫星细胞96小时,采用RT-PCR技术检测肌卫星细胞MGF mRNA的表达,用CCK-8检测卫星细胞的增殖情况,并检测细胞总蛋白含量.结果 与0 ng/ml MGF组相比,25 ng/ml和50 ng/ml组OD值在各时间点均显著性增加,其中25 ng/ml组在24 h至96 h内OD值具有高度显著性(P＜0.01),50 ng/ml组在24 h至72 h内也有高度显著性的增加(P＜0.01)；25 ng/ml和50 ng/ml组MGF mRNA的表达量均显著高于对照组(P＜0.05),其它组的表达与对照组无显著性差异.总蛋白含量也显示,与0 ng/ml MGF组相比,25 ng/ml和50 ng/ml组均有显著性升高(P＜0.05).结论 适宜浓度的MGF具有促进肌卫星细胞增殖的作用,其中浓度为25 ng/ml和50 ng/ml时具有较强的促增殖作用,但有一定的时间差异.
目的 骨骼肌衛星細胞是肌源性榦細胞,該細胞的增殖受一繫列生長因子的影響.而機械生長因子( mechano growth factor,MGF)是近年來髮現的一種對力學信號敏感的自分泌跼部生長因子,可以激活肌衛星細胞的增殖.本研究採用不同濃度的MGF榦預體外培養的骨骼肌衛星細胞,探討促進衛星細胞增殖的適宜濃度.方法 用Ⅱ型膠原酶和胰蛋白酶兩步酶消化法分離骨骼肌衛星細胞,待細胞同步化後,分彆應用不同濃度的MGF(0 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml和150 ng/ml)榦預原代培養的骨骼肌衛星細胞96小時,採用RT-PCR技術檢測肌衛星細胞MGF mRNA的錶達,用CCK-8檢測衛星細胞的增殖情況,併檢測細胞總蛋白含量.結果 與0 ng/ml MGF組相比,25 ng/ml和50 ng/ml組OD值在各時間點均顯著性增加,其中25 ng/ml組在24 h至96 h內OD值具有高度顯著性(P＜0.01),50 ng/ml組在24 h至72 h內也有高度顯著性的增加(P＜0.01)；25 ng/ml和50 ng/ml組MGF mRNA的錶達量均顯著高于對照組(P＜0.05),其它組的錶達與對照組無顯著性差異.總蛋白含量也顯示,與0 ng/ml MGF組相比,25 ng/ml和50 ng/ml組均有顯著性升高(P＜0.05).結論 適宜濃度的MGF具有促進肌衛星細胞增殖的作用,其中濃度為25 ng/ml和50 ng/ml時具有較彊的促增殖作用,但有一定的時間差異.
목적 골격기위성세포시기원성간세포,해세포적증식수일계렬생장인자적영향.이궤계생장인자( mechano growth factor,MGF)시근년래발현적일충대역학신호민감적자분비국부생장인자,가이격활기위성세포적증식.본연구채용불동농도적MGF간예체외배양적골격기위성세포,탐토촉진위성세포증식적괄의농도.방법 용Ⅱ형효원매화이단백매량보매소화법분리골격기위성세포,대세포동보화후,분별응용불동농도적MGF(0 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml화150 ng/ml)간예원대배양적골격기위성세포96소시,채용RT-PCR기술검측기위성세포MGF mRNA적표체,용CCK-8검측위성세포적증식정황,병검측세포총단백함량.결과 여0 ng/ml MGF조상비,25 ng/ml화50 ng/ml조OD치재각시간점균현저성증가,기중25 ng/ml조재24 h지96 h내OD치구유고도현저성(P＜0.01),50 ng/ml조재24 h지72 h내야유고도현저성적증가(P＜0.01)；25 ng/ml화50 ng/ml조MGF mRNA적표체량균현저고우대조조(P＜0.05),기타조적표체여대조조무현저성차이.총단백함량야현시,여0 ng/ml MGF조상비,25 ng/ml화50 ng/ml조균유현저성승고(P＜0.05).결론 괄의농도적MGF구유촉진기위성세포증식적작용,기중농도위25 ng/ml화50 ng/ml시구유교강적촉증식작용,단유일정적시간차이.
