CAJ | 학술논문

目的观察新型合成三肽[Arg(NO3)-Lys(OCH3)-Arg(NO3)]对巨噬细胞株(RAW264.7)左旋-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响.方法培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5 mmol/L)加入脂多糖(LPS,1μg/L)随机分为3组(每组n=6),分别加入双蒸水、三肽(1×10-4mol/L)、NG甲基-L-精氨酸(L-NMMA,1×10 -4 mol/L),对照组只含L-Arg(n=6),作用24 h后,检测亚硝酸盐(NO2-)、3H-L-Arg转运量;培养的巨噬细胞[培养液中含L-Arg(0～2 mmol/L)]加入LPS(1μ/L)24 h后,检测NO2-;培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5mmol/L)加入LPS(1μg/L)后分别加三肽[(0～10)×10-4mol/L]24 h后,检测NO2-、3H-L-Arg转运量.结果LPS刺激细胞产生NO的量和L-Arg率转运分别为非刺激组的50倍和2.7倍,三肽(1×10-4mol/L)即可明显降低NO的生成及抑制L-Arg的转运(分别降低71%、67%),较L-NMMA(1×10.mol/L)作用要强(P＜0.05);NO的生成依赖于细胞外L-Arg,并成浓度依赖性,其米氏常数(Km):(0.162±0.015)mmol/L、最大转运速率(Vmax):(91.2±2.3)μmol/(24 h·106cells);三肽成浓度依赖性的降低细胞L-Arg转运和NO的生成,半数有效抑制剂量(EC50)分别为0.21×10-4mol/L、1.27×10-4mol/L.结论LPS作用于巨噬细胞引起L-Arg转运增加;三肽通过抑制细胞L-Arg转运及与L-Arg竞争性结合一氧化氮合酶作用位点,影响NO的生成.
목적관찰신형합성삼태[Arg(NO3)-Lys(OCH3)-Arg(NO3)]대거서세포주(RAW264.7)좌선-정안산/일양화담(L-Arg/NO)도경적영향.방법배양적거서세포(배양액중함L-Arg 0.5 mmol/L)가입지다당(LPS,1μg/L)수궤분위3조(매조n=6),분별가입쌍증수、삼태(1×10-4mol/L)、NG갑기-L-정안산(L-NMMA,1×10 -4 mol/L),대조조지함L-Arg(n=6),작용24 h후,검측아초산염(NO2-)、3H-L-Arg전운량;배양적거서세포[배양액중함L-Arg(0～2 mmol/L)]가입LPS(1μ/L)24 h후,검측NO2-;배양적거서세포(배양액중함L-Arg 0.5mmol/L)가입LPS(1μg/L)후분별가삼태[(0～10)×10-4mol/L]24 h후,검측NO2-、3H-L-Arg전운량.결과LPS자격세포산생NO적량화L-Arg솔전운분별위비자격조적50배화2.7배,삼태(1×10-4mol/L)즉가명현강저NO적생성급억제L-Arg적전운(분별강저71%、67%),교L-NMMA(1×10.mol/L)작용요강(P＜0.05);NO적생성의뢰우세포외L-Arg,병성농도의뢰성,기미씨상수(Km):(0.162±0.015)mmol/L、최대전운속솔(Vmax):(91.2±2.3)μmol/(24 h·106cells);삼태성농도의뢰성적강저세포L-Arg전운화NO적생성,반수유효억제제량(EC50)분별위0.21×10-4mol/L、1.27×10-4mol/L.결론LPS작용우거서세포인기L-Arg전운증가;삼태통과억제세포L-Arg전운급여L-Arg경쟁성결합일양화담합매작용위점,영향NO적생성.