中国矫形外科杂志
中國矯形外科雜誌
중국교형외과잡지
THE ORTHOPEDIC JOURNAL OF CHINA
2005年
19期
1489-1491
,共3页
黄仕龙%陈安民%郭风劲%张衣北
黃仕龍%陳安民%郭風勁%張衣北
황사룡%진안민%곽풍경%장의북
PTHrp基因%质粒%增殖区软骨细胞%表达载体
PTHrp基因%質粒%增殖區軟骨細胞%錶達載體
PTHrp기인%질립%증식구연골세포%표체재체
[目的]分离、鉴定大鼠骨骺生长板增殖区软骨细胞,克隆甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrp)基因并构建真核表达载体pEGFP-IRES2-PTHrp.[方法]Percoll不连续密度梯度离心法分离生长板增殖区软骨细胞,用X型胶原抗体和电镜鉴定,提取总RNA,RT-PCR方法获得PTHrp基因的全长cDNA,插入pCR2.1 TA克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pEGFP-IRES2.[结果]分离出增殖区软骨细胞,经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒.[结论]准确分离增殖区软骨细胞并成功构建了PTHrp基因的真核表达载体,为进一步揭示PTHrp的生物学功能及其在在软骨细胞的分化和骨骼形态发生中的作用奠定了基础.
[目的]分離、鑒定大鼠骨骺生長闆增殖區軟骨細胞,剋隆甲狀徬腺激素相關蛋白(PTHrp)基因併構建真覈錶達載體pEGFP-IRES2-PTHrp.[方法]Percoll不連續密度梯度離心法分離生長闆增殖區軟骨細胞,用X型膠原抗體和電鏡鑒定,提取總RNA,RT-PCR方法穫得PTHrp基因的全長cDNA,插入pCR2.1 TA剋隆載體中進行序列測定,測序正確後將其亞剋隆至錶達載體pEGFP-IRES2.[結果]分離齣增殖區軟骨細胞,經限製性內切酶酶切圖譜分析和DNA序列測定證實目的基因已插入重組質粒.[結論]準確分離增殖區軟骨細胞併成功構建瞭PTHrp基因的真覈錶達載體,為進一步揭示PTHrp的生物學功能及其在在軟骨細胞的分化和骨骼形態髮生中的作用奠定瞭基礎.
[목적]분리、감정대서골후생장판증식구연골세포,극륭갑상방선격소상관단백(PTHrp)기인병구건진핵표체재체pEGFP-IRES2-PTHrp.[방법]Percoll불련속밀도제도리심법분리생장판증식구연골세포,용X형효원항체화전경감정,제취총RNA,RT-PCR방법획득PTHrp기인적전장cDNA,삽입pCR2.1 TA극륭재체중진행서렬측정,측서정학후장기아극륭지표체재체pEGFP-IRES2.[결과]분리출증식구연골세포,경한제성내절매매절도보분석화DNA서렬측정증실목적기인이삽입중조질립.[결론]준학분리증식구연골세포병성공구건료PTHrp기인적진핵표체재체,위진일보게시PTHrp적생물학공능급기재재연골세포적분화화골격형태발생중적작용전정료기출.
