南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
1期
72-76
,共5页
马苏%戴建君%李玉峰%段舒怡%姜平
馬囌%戴建君%李玉峰%段舒怡%薑平
마소%대건군%리옥봉%단서이%강평
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)%GP5蛋白%单克隆抗体%中和抗体
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)%GP5蛋白%單剋隆抗體%中和抗體
저번식여호흡종합정병독(PRRSV)%GP5단백%단극륭항체%중화항체
利用重组真核质粒pcDNA3-GP5免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到3株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,分别命名为4C9、5D10、5F12,其中5D10的Ig亚类为IgM.ELISA检测杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价为1∶64～1∶1 024,腹水的效价为1∶3 200～1∶10 240,IFA和IPMA的检测结果均为阳性.Western-blot检测证明,这3株McAb均针对PRRSV的GP5蛋白.中和试验表明,5D10和5F12具有病毒中和活性,中和效价分别为1∶40和1∶80.5D10相对亲和力大于5F12,3株细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体,表明抗GP5蛋白中和性McAb制备成功.
利用重組真覈質粒pcDNA3-GP5免疫BALB/c小鼠,取脾細胞和骨髓瘤細胞SP2/0融閤,經間接ELISA篩選和3次有限稀釋法剋隆,得到3株能穩定分泌抗豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)GP5蛋白的單剋隆抗體(McAb)雜交瘤細胞株,分彆命名為4C9、5D10、5F12,其中5D10的Ig亞類為IgM.ELISA檢測雜交瘤細胞培養上清液抗體的效價為1∶64～1∶1 024,腹水的效價為1∶3 200～1∶10 240,IFA和IPMA的檢測結果均為暘性.Western-blot檢測證明,這3株McAb均針對PRRSV的GP5蛋白.中和試驗錶明,5D10和5F12具有病毒中和活性,中和效價分彆為1∶40和1∶80.5D10相對親和力大于5F12,3株細胞連續培養20代後仍能穩定分泌抗體,錶明抗GP5蛋白中和性McAb製備成功.
이용중조진핵질립pcDNA3-GP5면역BALB/c소서,취비세포화골수류세포SP2/0융합,경간접ELISA사선화3차유한희석법극륭,득도3주능은정분비항저번식여호흡종합정병독(PRRSV)GP5단백적단극륭항체(McAb)잡교류세포주,분별명명위4C9、5D10、5F12,기중5D10적Ig아류위IgM.ELISA검측잡교류세포배양상청액항체적효개위1∶64～1∶1 024,복수적효개위1∶3 200～1∶10 240,IFA화IPMA적검측결과균위양성.Western-blot검측증명,저3주McAb균침대PRRSV적GP5단백.중화시험표명,5D10화5F12구유병독중화활성,중화효개분별위1∶40화1∶80.5D10상대친화력대우5F12,3주세포련속배양20대후잉능은정분비항체,표명항GP5단백중화성McAb제비성공.
