四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
4期
575-578,603
,共5页
李凯%任婧婧%张洁%刘凯%齐彦宇%王修杰%肖恒怡%林苹
李凱%任婧婧%張潔%劉凱%齊彥宇%王脩傑%肖恆怡%林蘋
리개%임청청%장길%류개%제언우%왕수걸%초항이%림평
锌指蛋白637基因%乳腺癌EMT6细胞%稳定转染%细胞增殖
鋅指蛋白637基因%乳腺癌EMT6細胞%穩定轉染%細胞增殖
자지단백637기인%유선암EMT6세포%은정전염%세포증식
目的 构建锌指蛋白 Zfp637真核表达质粒及稳定转染过表达细胞,并观察 Zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响.方法 以正常小鼠脾脏组织cDNA作为模板扩增 Zfp637 DNA,定向插入到pEGFP-C3真核表达质粒中,酶切片段分析和测序鉴定以确定成功构建pEGFP- Zfp637重组质粒,通过脂质体介导pEGFP-Zfp637重组质粒转染小鼠乳腺癌株EMT6细胞,并且通过G418筛选出稳定转染细胞( Zfp637-EMT6).荧光显微镜下对Zfp637进行亚细胞定位;RT-PCR检测Zfp637-EMT6细胞中Zfp637基因表达;同时观察细胞生长状况,MTT法测定Zfp637-EMT6细胞的增殖活性.结果 重组质粒经鉴定证实具有Zfp637全长cDNA序列,所建立的Zfp637-EMT6细胞能稳定过表达 Zfp637基因,并且其细胞生长增殖显著增加.结论 成功构建pEGFP-Zfp637真核表达质粒,显示了 Zfp637能促进肿瘤细胞增殖,为进一步研究Zfp637基因的功能奠定了基础,并将为恶性肿瘤的基因治疗提供新靶点.
目的 構建鋅指蛋白 Zfp637真覈錶達質粒及穩定轉染過錶達細胞,併觀察 Zfp637基因對腫瘤細胞生長增殖的影響.方法 以正常小鼠脾髒組織cDNA作為模闆擴增 Zfp637 DNA,定嚮插入到pEGFP-C3真覈錶達質粒中,酶切片段分析和測序鑒定以確定成功構建pEGFP- Zfp637重組質粒,通過脂質體介導pEGFP-Zfp637重組質粒轉染小鼠乳腺癌株EMT6細胞,併且通過G418篩選齣穩定轉染細胞( Zfp637-EMT6).熒光顯微鏡下對Zfp637進行亞細胞定位;RT-PCR檢測Zfp637-EMT6細胞中Zfp637基因錶達;同時觀察細胞生長狀況,MTT法測定Zfp637-EMT6細胞的增殖活性.結果 重組質粒經鑒定證實具有Zfp637全長cDNA序列,所建立的Zfp637-EMT6細胞能穩定過錶達 Zfp637基因,併且其細胞生長增殖顯著增加.結論 成功構建pEGFP-Zfp637真覈錶達質粒,顯示瞭 Zfp637能促進腫瘤細胞增殖,為進一步研究Zfp637基因的功能奠定瞭基礎,併將為噁性腫瘤的基因治療提供新靶點.
목적 구건자지단백 Zfp637진핵표체질립급은정전염과표체세포,병관찰 Zfp637기인대종류세포생장증식적영향.방법 이정상소서비장조직cDNA작위모판확증 Zfp637 DNA,정향삽입도pEGFP-C3진핵표체질립중,매절편단분석화측서감정이학정성공구건pEGFP- Zfp637중조질립,통과지질체개도pEGFP-Zfp637중조질립전염소서유선암주EMT6세포,병차통과G418사선출은정전염세포( Zfp637-EMT6).형광현미경하대Zfp637진행아세포정위;RT-PCR검측Zfp637-EMT6세포중Zfp637기인표체;동시관찰세포생장상황,MTT법측정Zfp637-EMT6세포적증식활성.결과 중조질립경감정증실구유Zfp637전장cDNA서렬,소건립적Zfp637-EMT6세포능은정과표체 Zfp637기인,병차기세포생장증식현저증가.결론 성공구건pEGFP-Zfp637진핵표체질립,현시료 Zfp637능촉진종류세포증식,위진일보연구Zfp637기인적공능전정료기출,병장위악성종류적기인치료제공신파점.
