中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
5期
97-100
,共4页
金黄色葡萄球菌%抗原表位%串联表达%多克隆抗体
金黃色葡萄毬菌%抗原錶位%串聯錶達%多剋隆抗體
금황색포도구균%항원표위%천련표체%다극륭항체
为获得金黄色葡萄球菌特异性抗原蛋白并以此制备多克隆抗体,应用DNAStar软件筛选金黄色葡萄球菌FnbpA、ClfA、Ebps的抗原表位,以柔性氨基酸序列连接后进行全基因合成,将目的基因克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,转化至大肠杆菌感受态细胞,诱导表达,采用sepharose 4B柱亲和层析纯化表达蛋白,制备抗原后对家兔进行皮下多点注射,于第42天采集外周血,获得血清.结果表明,本试验成功构建了金黄色葡萄球菌抗原基因表达载体,并获得了高免血清,经ELIsA的方法检测血清效价可达到1:10000以上,成功制备多克隆抗体,为以后采用免疫学方法快速检测金黄色葡萄球菌奠定了基础.
為穫得金黃色葡萄毬菌特異性抗原蛋白併以此製備多剋隆抗體,應用DNAStar軟件篩選金黃色葡萄毬菌FnbpA、ClfA、Ebps的抗原錶位,以柔性氨基痠序列連接後進行全基因閤成,將目的基因剋隆到pGEX-4T-1原覈錶達載體,轉化至大腸桿菌感受態細胞,誘導錶達,採用sepharose 4B柱親和層析純化錶達蛋白,製備抗原後對傢兔進行皮下多點註射,于第42天採集外週血,穫得血清.結果錶明,本試驗成功構建瞭金黃色葡萄毬菌抗原基因錶達載體,併穫得瞭高免血清,經ELIsA的方法檢測血清效價可達到1:10000以上,成功製備多剋隆抗體,為以後採用免疫學方法快速檢測金黃色葡萄毬菌奠定瞭基礎.
위획득금황색포도구균특이성항원단백병이차제비다극륭항체,응용DNAStar연건사선금황색포도구균FnbpA、ClfA、Ebps적항원표위,이유성안기산서렬련접후진행전기인합성,장목적기인극륭도pGEX-4T-1원핵표체재체,전화지대장간균감수태세포,유도표체,채용sepharose 4B주친화층석순화표체단백,제비항원후대가토진행피하다점주사,우제42천채집외주혈,획득혈청.결과표명,본시험성공구건료금황색포도구균항원기인표체재체,병획득료고면혈청,경ELIsA적방법검측혈청효개가체도1:10000이상,성공제비다극륭항체,위이후채용면역학방법쾌속검측금황색포도구균전정료기출.
