农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
634-641
,共8页
张跃进%郝晓燕%梁宗锁%林文超%郭宏波
張躍進%郝曉燕%樑宗鎖%林文超%郭宏波
장약진%학효연%량종쇄%림문초%곽굉파
莲藕%多酚氧化酶%基因克隆%序列全长%基因表达
蓮藕%多酚氧化酶%基因剋隆%序列全長%基因錶達
련우%다분양화매%기인극륭%서렬전장%기인표체
为获得莲藕中多酚氧化酶(Ppo)基因序列信息及其表达情况,运用PACE技术从莲藕(Nelumbonucifera Gaertn.ssp.nucifera)茎尖中克隆到多酚氧化酶基因全长序列,其cDNA全长2 074 bp,完整的编码框为1 503 bp,编码501个氨基酸,5’端有160 bp非编码区,3’端有411bp非编码区(GenBank登陆号为HQ380894).采用生物信息学方法发现该蛋白分子量约为56.8 kD,pI为8.60,具典型的酪氨酸家族结构域,无信号肽结构,但有跨膜螺旋的亲水性蛋白,a-螺旋和β-折叠分散于整个多肽链中.半定量RT-PCR结果显示,该基因在莲藕茎尖、幼叶、莲藕鲜切片、花瓣、茎杆5种组织中均有表达.方差分析表明,茎尖中PPO表达量与幼叶差异不显著,但显著高于其余三个部位;幼叶中表达量与莲藕鲜切片之间差异不显著,但显著高于花瓣和茎杆;花瓣和茎杆中PPO表达量最低,两者无显著差异.上述结果说明作为重要分生组织的莲藕茎尖产生的PPO可能不具活性或极不稳定,随着植株的生长发育被分配到各组织中,在特定时空下被激活并担负相应的职责功能.
為穫得蓮藕中多酚氧化酶(Ppo)基因序列信息及其錶達情況,運用PACE技術從蓮藕(Nelumbonucifera Gaertn.ssp.nucifera)莖尖中剋隆到多酚氧化酶基因全長序列,其cDNA全長2 074 bp,完整的編碼框為1 503 bp,編碼501箇氨基痠,5’耑有160 bp非編碼區,3’耑有411bp非編碼區(GenBank登陸號為HQ380894).採用生物信息學方法髮現該蛋白分子量約為56.8 kD,pI為8.60,具典型的酪氨痠傢族結構域,無信號肽結構,但有跨膜螺鏇的親水性蛋白,a-螺鏇和β-摺疊分散于整箇多肽鏈中.半定量RT-PCR結果顯示,該基因在蓮藕莖尖、幼葉、蓮藕鮮切片、花瓣、莖桿5種組織中均有錶達.方差分析錶明,莖尖中PPO錶達量與幼葉差異不顯著,但顯著高于其餘三箇部位;幼葉中錶達量與蓮藕鮮切片之間差異不顯著,但顯著高于花瓣和莖桿;花瓣和莖桿中PPO錶達量最低,兩者無顯著差異.上述結果說明作為重要分生組織的蓮藕莖尖產生的PPO可能不具活性或極不穩定,隨著植株的生長髮育被分配到各組織中,在特定時空下被激活併擔負相應的職責功能.
위획득련우중다분양화매(Ppo)기인서렬신식급기표체정황,운용PACE기술종련우(Nelumbonucifera Gaertn.ssp.nucifera)경첨중극륭도다분양화매기인전장서렬,기cDNA전장2 074 bp,완정적편마광위1 503 bp,편마501개안기산,5’단유160 bp비편마구,3’단유411bp비편마구(GenBank등륙호위HQ380894).채용생물신식학방법발현해단백분자량약위56.8 kD,pI위8.60,구전형적락안산가족결구역,무신호태결구,단유과막라선적친수성단백,a-라선화β-절첩분산우정개다태련중.반정량RT-PCR결과현시,해기인재련우경첨、유협、련우선절편、화판、경간5충조직중균유표체.방차분석표명,경첨중PPO표체량여유협차이불현저,단현저고우기여삼개부위;유협중표체량여련우선절편지간차이불현저,단현저고우화판화경간;화판화경간중PPO표체량최저,량자무현저차이.상술결과설명작위중요분생조직적련우경첨산생적PPO가능불구활성혹겁불은정,수착식주적생장발육피분배도각조직중,재특정시공하피격활병담부상응적직책공능.