CAJ | 학술논문

应用荧光光谱技术,对尿素与牛血清蛋白在30℃水溶液中的结合作用及造成牛血清蛋白变性的过程进行了研究,获取了尿素诱导牛血清蛋白变性时相对荧光强度和峰位的变化规律.用Pace等提出的公式分析了相对荧光强度数据,得到了牛血清蛋白变性时的伸展分数fu随溶液pH值和尿素浓度的变化规律.求出了变性平衡常数Ku,伸展吉布斯自由能△Gu,衡量蛋白质对变性剂稳定性的参△GH2O以及衡量蛋白质变性协同性的参量m和变性中点[D]1/2.通过对实验结果的热力学分析表明,尿素是通过直接和间接的两种作用造成牛血清蛋白变性的,伸展分数fu随尿素浓度的变化呈现3个阶段:尿素浓度达到4 mol·L-1之前为第一阶段,主要产生的是尿素与牛血清蛋白的直接结合作用,在弱酸性条件下这种作用较强；尿素浓度为4 mol·L-1到6 mol·L-1之间为第二阶段,主要通过与溶剂水的作用间接造成蛋白质疏水基团周围水的氢键结构的变化,牛血清蛋白的结构变得更为紧密,形成蛋白质粘稠效应.尿素浓度超过6 mol·L-1之后为第三阶段,尿素分子继续与暴露出来的基团进行结合,当尿素浓度达到8 mol·L-1时,伸展分数约为1,结构完全打开,牛血清蛋白完全变性.
응용형광광보기술,대뇨소여우혈청단백재30℃수용액중적결합작용급조성우혈청단백변성적과정진행료연구,획취료뇨소유도우혈청단백변성시상대형광강도화봉위적변화규률.용Pace등제출적공식분석료상대형광강도수거,득도료우혈청단백변성시적신전분수fu수용액pH치화뇨소농도적변화규률.구출료변성평형상수Ku,신전길포사자유능△Gu,형량단백질대변성제은정성적삼△GH2O이급형량단백질변성협동성적삼량m화변성중점[D]1/2.통과대실험결과적열역학분석표명,뇨소시통과직접화간접적량충작용조성우혈청단백변성적,신전분수fu수뇨소농도적변화정현3개계단:뇨소농도체도4 mol·L-1지전위제일계단,주요산생적시뇨소여우혈청단백적직접결합작용,재약산성조건하저충작용교강；뇨소농도위4 mol·L-1도6 mol·L-1지간위제이계단,주요통과여용제수적작용간접조성단백질소수기단주위수적경건결구적변화,우혈청단백적결구변득경위긴밀,형성단백질점주효응.뇨소농도초과6 mol·L-1지후위제삼계단,뇨소분자계속여폭로출래적기단진행결합,당뇨소농도체도8 mol·L-1시,신전분수약위1,결구완전타개,우혈청단백완전변성.