CAJ | 학술논문

目的建立高分辨率的膀胱移行上皮癌不同时期的双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况,寻找其差异表达蛋白,为寻找癌变相关蛋白奠定实验基础.方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌不同分期的组织,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析,寻找差异表达蛋白.在此基础上应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质.结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶的平均蛋白质匹配率达76%,蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间的蛋白质点在等电聚焦IEF方向偏差是(0.98±0.26)mm,SDS-PAGE方向偏差是(1.23±0.22)mm,并且得到了若干与细胞增生、分化、周期调控信号转导或肿瘤发生有关的蛋白质,例如SFN,热休克蛋白-27等.结论为进一步探讨癌变机理及筛选其特异性分子标志物打下方法学基础.
목적건립고분변솔적방광이행상피암불동시기적쌍향응효전영도보,병초보분석기단백질표체정황,심조기차이표체단백,위심조암변상관단백전정실험기출.방법용고상pH제도쌍향응효전영기술분리방광이행상피암불동분기적조직,응효고마사량람염색,연후이용GS-800Calibrated Densitometer응효성상계통획취도상,용PDQuest2D분석연건대도상진행배경소감、반점검측、필배、반점위치중복성적계통분석,심조차이표체단백.재차기출상응용기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI-TOF)득도상응적태질지문도보,연후수색수거고감정부분차이단백질.결과획득료배경청석、분변솔화중복성교호적쌍향응효전영도보,삼괴효적평균단백질필배솔체76%,단백질점재위치상유교호적중복성,불동효간적단백질점재등전취초IEF방향편차시(0.98±0.26)mm,SDS-PAGE방향편차시(1.23±0.22)mm,병차득도료약간여세포증생、분화、주기조공신호전도혹종류발생유관적단백질,례여SFN,열휴극단백-27등.결론위진일보탐토암변궤리급사선기특이성분자표지물타하방법학기출.