福建林学院学报
福建林學院學報
복건림학원학보
JOURNAL OF FUJIAN COLLEGE OF FORESTRY
2006年
2期
152-155
,共4页
杨华%宋绪忠%尹光天%白嘉雨%甘四明
楊華%宋緒忠%尹光天%白嘉雨%甘四明
양화%송서충%윤광천%백가우%감사명
黄藤%ISSR%优化
黃籐%ISSR%優化
황등%ISSR%우화
在利用ISSR技术对黄藤进行分子生物学研究过程中,对影响PCR 扩增效果的一些因素,如模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度以及退火温度等指标进行筛选和优化,获得用于黄藤ISSR-PCR 分析最适宜的PCR反应条件:20 μLPCR反应体积中含有1×缓冲液,20 ng 模板DNA,2 mmol·L-1 MgCl2,100 μmol·L-1 dNTP,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.4 μmol·L-1引物,2%甲酰胺,0.5 mmol·L-1亚精胺.扩增程序为:94 ℃预变性5 min;再35个循环:94 ℃ 30 s,52 ℃ 45 s和72 ℃ 1.5 min;最后72 ℃延伸7 min.
在利用ISSR技術對黃籐進行分子生物學研究過程中,對影響PCR 擴增效果的一些因素,如模闆DNA濃度、Mg2+濃度、dNTPs濃度、Taq DNA聚閤酶濃度、引物濃度以及退火溫度等指標進行篩選和優化,穫得用于黃籐ISSR-PCR 分析最適宜的PCR反應條件:20 μLPCR反應體積中含有1×緩遲液,20 ng 模闆DNA,2 mmol·L-1 MgCl2,100 μmol·L-1 dNTP,1.5 U Taq DNA聚閤酶,0.4 μmol·L-1引物,2%甲酰胺,0.5 mmol·L-1亞精胺.擴增程序為:94 ℃預變性5 min;再35箇循環:94 ℃ 30 s,52 ℃ 45 s和72 ℃ 1.5 min;最後72 ℃延伸7 min.
재이용ISSR기술대황등진행분자생물학연구과정중,대영향PCR 확증효과적일사인소,여모판DNA농도、Mg2+농도、dNTPs농도、Taq DNA취합매농도、인물농도이급퇴화온도등지표진행사선화우화,획득용우황등ISSR-PCR 분석최괄의적PCR반응조건:20 μLPCR반응체적중함유1×완충액,20 ng 모판DNA,2 mmol·L-1 MgCl2,100 μmol·L-1 dNTP,1.5 U Taq DNA취합매,0.4 μmol·L-1인물,2%갑선알,0.5 mmol·L-1아정알.확증정서위:94 ℃예변성5 min;재35개순배:94 ℃ 30 s,52 ℃ 45 s화72 ℃ 1.5 min;최후72 ℃연신7 min.
