中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
12期
913-916
,共4页
饶桂荣%黄明%杨富强%莫国玉%刘惠萍%陈光明
饒桂榮%黃明%楊富彊%莫國玉%劉惠萍%陳光明
요계영%황명%양부강%막국옥%류혜평%진광명
治疗性HBV DNA疫苗%质粒%纯化%质量控制
治療性HBV DNA疫苗%質粒%純化%質量控製
치료성HBV DNA역묘%질립%순화%질량공제
目的 研究双质粒HBV DNA疫苗(pS2.S和pFP)的纯化工艺,并建立质控标准.方法 首先对两工程菌(DHSα/pS2.S和DH5α/pFP)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;然后通过三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)进行质粒纯化,并检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定.结果 质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量的RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,最后经阴离子柱层析有效去除内毒素,并浓缩了质粒,质粒得率为0.9～1.1 mg/g菌,质粒总回收率达78%.三批终产品全面质量检定均符合规定.结论 建立了稳定的双质粒HBV DNA疫苗(pS2.S和pFP)的纯化工艺及质量控制标准,为进一步研究奠定基础.
目的 研究雙質粒HBV DNA疫苗(pS2.S和pFP)的純化工藝,併建立質控標準.方法 首先對兩工程菌(DHSα/pS2.S和DH5α/pFP)的高效髮酵菌體採用堿裂解法進行質粒初提;然後通過三步柱層析(依次為分子篩層析、親和層析、陰離子層析)進行質粒純化,併檢測質粒含量、超螺鏇比例、內毒素等,最後對終產品質粒溶液進行全麵質量檢定.結果 質粒初提液通過分子篩層析後,去除瞭大量的RNA、宿主DNA、內毒素等,再經親和柱純化後穫得瞭高比例的超螺鏇質粒DNA,達95%,最後經陰離子柱層析有效去除內毒素,併濃縮瞭質粒,質粒得率為0.9～1.1 mg/g菌,質粒總迴收率達78%.三批終產品全麵質量檢定均符閤規定.結論 建立瞭穩定的雙質粒HBV DNA疫苗(pS2.S和pFP)的純化工藝及質量控製標準,為進一步研究奠定基礎.
목적 연구쌍질립HBV DNA역묘(pS2.S화pFP)적순화공예,병건립질공표준.방법 수선대량공정균(DHSα/pS2.S화DH5α/pFP)적고효발효균체채용감렬해법진행질립초제;연후통과삼보주층석(의차위분자사층석、친화층석、음리자층석)진행질립순화,병검측질립함량、초라선비례、내독소등,최후대종산품질립용액진행전면질량검정.결과 질립초제액통과분자사층석후,거제료대량적RNA、숙주DNA、내독소등,재경친화주순화후획득료고비례적초라선질립DNA,체95%,최후경음리자주층석유효거제내독소,병농축료질립,질립득솔위0.9～1.1 mg/g균,질립총회수솔체78%.삼비종산품전면질량검정균부합규정.결론 건립료은정적쌍질립HBV DNA역묘(pS2.S화pFP)적순화공예급질량공제표준,위진일보연구전정기출.
