内蒙古大学学报（自然科学版）
內矇古大學學報（自然科學版）
내몽고대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NEIMONGOL
2009年
1期
68-74
,共7页
苗素平%苗素生%扈廷茂%刘明秋
苗素平%苗素生%扈廷茂%劉明鞦
묘소평%묘소생%호정무%류명추
多顺反子%IRES%内皮折素基因%FHIT%EGFP
多順反子%IRES%內皮摺素基因%FHIT%EGFP
다순반자%IRES%내피절소기인%FHIT%EGFP
利用DNA重组技术将抗肿瘤血管生成的内皮抑素基因endostatin插入含有FHIT(抗肿瘤人脆性组氨酸三联体基因)和EGFP的pIRES2-FHIT-EGFP载体中构建了真核多顺反子表达载体pES-IRES-FHIT-IRES-EGFP,用脂质体法转染Hela细胞后,用G418筛选出稳定转染的细胞.经RT-PCR、RT-PCR southern blot、northern blot和免疫细胞化学分析,结果证明单顺反子和三顺反子在RNA水平都得到表达.在蛋白表达水平上,荧光观察和免疫细胞化学分析结果显示Endostatin、FHIT和EGFP在Hela细胞中均得到表达,为基因药物和肿瘤多基因治疗奠定了基础.
利用DNA重組技術將抗腫瘤血管生成的內皮抑素基因endostatin插入含有FHIT(抗腫瘤人脆性組氨痠三聯體基因)和EGFP的pIRES2-FHIT-EGFP載體中構建瞭真覈多順反子錶達載體pES-IRES-FHIT-IRES-EGFP,用脂質體法轉染Hela細胞後,用G418篩選齣穩定轉染的細胞.經RT-PCR、RT-PCR southern blot、northern blot和免疫細胞化學分析,結果證明單順反子和三順反子在RNA水平都得到錶達.在蛋白錶達水平上,熒光觀察和免疫細胞化學分析結果顯示Endostatin、FHIT和EGFP在Hela細胞中均得到錶達,為基因藥物和腫瘤多基因治療奠定瞭基礎.
이용DNA중조기술장항종류혈관생성적내피억소기인endostatin삽입함유FHIT(항종류인취성조안산삼련체기인)화EGFP적pIRES2-FHIT-EGFP재체중구건료진핵다순반자표체재체pES-IRES-FHIT-IRES-EGFP,용지질체법전염Hela세포후,용G418사선출은정전염적세포.경RT-PCR、RT-PCR southern blot、northern blot화면역세포화학분석,결과증명단순반자화삼순반자재RNA수평도득도표체.재단백표체수평상,형광관찰화면역세포화학분석결과현시Endostatin、FHIT화EGFP재Hela세포중균득도표체,위기인약물화종류다기인치료전정료기출.
