中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
1期
141-144
,共4页
杨海平%李和平%王丽荣%耿瑞鹏
楊海平%李和平%王麗榮%耿瑞鵬
양해평%리화평%왕려영%경서붕
脊髓损伤%骨髓间充质干细胞%一氧化氮%氨基胍%诱生型一氧化氮合酶抑制剂
脊髓損傷%骨髓間充質榦細胞%一氧化氮%氨基胍%誘生型一氧化氮閤酶抑製劑
척수손상%골수간충질간세포%일양화담%안기고%유생형일양화담합매억제제
背景:体内实验发现,骨髓间充质干细胞可在体内神经组织中分化为神经元样细胞,表达神经元抗原,并且骨髓间充质干细胞的存在对神经元的损伤有保护作用,这可能与骨髓间充质干细胞分泌的活性物质有关.目的:观察骨髓间充质干细胞移植联用诱导型一氧化氮合酶抑制剂-氮基胍对大鼠脊髓损伤修复的影响.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,细胞学观察,于2006-07/2008-02在河北工程大学附属医院外科实验室和中心实验室完成.材料:Wistar大鼠36只随机分成对照组、骨髓间充质干细胞组、联合移植组,每组12只.氨基胍由美国Sigma公司提供.方法:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,以Brdu标记细胞核.对照组:制备脊髓半切损伤模型不做处理.骨髓间充质干细胞组:制备脊髓半切损伤模型后.损伤上下各1 mm处移植骨髓间充质干细胞恳液共2 μL.联合移植组:制备脊髓半切损伤模型后,损伤上下各1 mm处移植骨髓间充质干细胞悬液8 μL,同时局部给予氨基胍100 mg/kg.主要观察指标:术后采用斜板试验及改良Tarlov评分评价动物后肢运动功能恢复情况.术后2个月,显微镜下观察移植后脊髓形态结构变化及移植物存活情况.神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫组织化学评价移植对脊髓再生的影响.结果:下肢运动功能评价联合移植组优于骨髓间充质干细胞组,骨髓间充质干细胞组优于对照组.免疫组织化学检测发现,脊髓损伤区有新生束状轴突伸向断端,嗜银染色可见脊髓断端的再生轴突长入断端间组织中,部分连接两端面.损伤阶段脊髓内可见Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活,灰质分布较白质多,以注射部位向周围损伤组织迁移,联合应用氨基胍组Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活多.联合移植组术后2个月神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫阳性反应的面积比均高于其他各组.结论:骨髓间充质干细胞联合氨基胍移植促进大鼠半横断脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应.
揹景:體內實驗髮現,骨髓間充質榦細胞可在體內神經組織中分化為神經元樣細胞,錶達神經元抗原,併且骨髓間充質榦細胞的存在對神經元的損傷有保護作用,這可能與骨髓間充質榦細胞分泌的活性物質有關.目的:觀察骨髓間充質榦細胞移植聯用誘導型一氧化氮閤酶抑製劑-氮基胍對大鼠脊髓損傷脩複的影響.設計、時間及地點: 隨機對照動物實驗,細胞學觀察,于2006-07/2008-02在河北工程大學附屬醫院外科實驗室和中心實驗室完成.材料:Wistar大鼠36隻隨機分成對照組、骨髓間充質榦細胞組、聯閤移植組,每組12隻.氨基胍由美國Sigma公司提供.方法:採用密度梯度離心法分離培養大鼠骨髓間充質榦細胞,以Brdu標記細胞覈.對照組:製備脊髓半切損傷模型不做處理.骨髓間充質榦細胞組:製備脊髓半切損傷模型後.損傷上下各1 mm處移植骨髓間充質榦細胞懇液共2 μL.聯閤移植組:製備脊髓半切損傷模型後,損傷上下各1 mm處移植骨髓間充質榦細胞懸液8 μL,同時跼部給予氨基胍100 mg/kg.主要觀察指標:術後採用斜闆試驗及改良Tarlov評分評價動物後肢運動功能恢複情況.術後2箇月,顯微鏡下觀察移植後脊髓形態結構變化及移植物存活情況.神經微絲和膠質原纖維痠性蛋白免疫組織化學評價移植對脊髓再生的影響.結果:下肢運動功能評價聯閤移植組優于骨髓間充質榦細胞組,骨髓間充質榦細胞組優于對照組.免疫組織化學檢測髮現,脊髓損傷區有新生束狀軸突伸嚮斷耑,嗜銀染色可見脊髓斷耑的再生軸突長入斷耑間組織中,部分連接兩耑麵.損傷階段脊髓內可見Brdu標記暘性骨髓間充質榦細胞存活,灰質分佈較白質多,以註射部位嚮週圍損傷組織遷移,聯閤應用氨基胍組Brdu標記暘性骨髓間充質榦細胞存活多.聯閤移植組術後2箇月神經微絲和膠質原纖維痠性蛋白免疫暘性反應的麵積比均高于其他各組.結論:骨髓間充質榦細胞聯閤氨基胍移植促進大鼠半橫斷脊髓結構和功能恢複的效果明顯優于單純細胞移植組,兩者聯用具有協同效應.
배경:체내실험발현,골수간충질간세포가재체내신경조직중분화위신경원양세포,표체신경원항원,병차골수간충질간세포적존재대신경원적손상유보호작용,저가능여골수간충질간세포분비적활성물질유관.목적:관찰골수간충질간세포이식련용유도형일양화담합매억제제-담기고대대서척수손상수복적영향.설계、시간급지점: 수궤대조동물실험,세포학관찰,우2006-07/2008-02재하북공정대학부속의원외과실험실화중심실험실완성.재료:Wistar대서36지수궤분성대조조、골수간충질간세포조、연합이식조,매조12지.안기고유미국Sigma공사제공.방법:채용밀도제도리심법분리배양대서골수간충질간세포,이Brdu표기세포핵.대조조:제비척수반절손상모형불주처리.골수간충질간세포조:제비척수반절손상모형후.손상상하각1 mm처이식골수간충질간세포간액공2 μL.연합이식조:제비척수반절손상모형후,손상상하각1 mm처이식골수간충질간세포현액8 μL,동시국부급여안기고100 mg/kg.주요관찰지표:술후채용사판시험급개량Tarlov평분평개동물후지운동공능회복정황.술후2개월,현미경하관찰이식후척수형태결구변화급이식물존활정황.신경미사화효질원섬유산성단백면역조직화학평개이식대척수재생적영향.결과:하지운동공능평개연합이식조우우골수간충질간세포조,골수간충질간세포조우우대조조.면역조직화학검측발현,척수손상구유신생속상축돌신향단단,기은염색가견척수단단적재생축돌장입단단간조직중,부분련접량단면.손상계단척수내가견Brdu표기양성골수간충질간세포존활,회질분포교백질다,이주사부위향주위손상조직천이,연합응용안기고조Brdu표기양성골수간충질간세포존활다.연합이식조술후2개월신경미사화효질원섬유산성단백면역양성반응적면적비균고우기타각조.결론:골수간충질간세포연합안기고이식촉진대서반횡단척수결구화공능회복적효과명현우우단순세포이식조,량자련용구유협동효응.