华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2010年
5期
635-638
,共4页
组织因子途径抑制物2%卵巢肿瘤%细胞凋亡
組織因子途徑抑製物2%卵巢腫瘤%細胞凋亡
조직인자도경억제물2%란소종류%세포조망
目的 探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制.方法 脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质表达情况;利用流式细胞仪检测转染前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;通过Western blot技术检测转染前后凋亡相关蛋白 Caspase-3、Caspase-9的变化情况.结果 转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2 mRNA和相应蛋白质的表达;转染TFPI-2后细胞凋亡率明显增加[(62.32±3.72)% vs (0.56±0.17)%,P<0.01],且Caspase-3、Caspase-9比转染前高表达.结论 TFPI-2可通过增加Caspase-3、Caspase-9的活性,诱导卵巢癌细胞的凋亡,为进一步开展卵巢癌基因治疗提供实验依据.
目的 探討組織因子途徑抑製物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)錶達對卵巢癌細胞殺傷和誘導凋亡的機製.方法 脂質體介導人類TFPI-2真覈錶達載體pBos-Cite-neo/TFPI-2轉染卵巢癌細胞繫A2780,用G418篩選暘性細胞,經逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot技術檢測轉染前後卵巢癌細胞中TFPI-2 mRNA以及相應蛋白質錶達情況;利用流式細胞儀檢測轉染前後卵巢癌細胞凋亡率的改變;通過Western blot技術檢測轉染前後凋亡相關蛋白 Caspase-3、Caspase-9的變化情況.結果 轉染成功的卵巢癌細胞證實有TFPI-2 mRNA和相應蛋白質的錶達;轉染TFPI-2後細胞凋亡率明顯增加[(62.32±3.72)% vs (0.56±0.17)%,P<0.01],且Caspase-3、Caspase-9比轉染前高錶達.結論 TFPI-2可通過增加Caspase-3、Caspase-9的活性,誘導卵巢癌細胞的凋亡,為進一步開展卵巢癌基因治療提供實驗依據.
목적 탐토조직인자도경억제물2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)표체대란소암세포살상화유도조망적궤제.방법 지질체개도인류TFPI-2진핵표체재체pBos-Cite-neo/TFPI-2전염란소암세포계A2780,용G418사선양성세포,경역전록취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot기술검측전염전후란소암세포중TFPI-2 mRNA이급상응단백질표체정황;이용류식세포의검측전염전후란소암세포조망솔적개변;통과Western blot기술검측전염전후조망상관단백 Caspase-3、Caspase-9적변화정황.결과 전염성공적란소암세포증실유TFPI-2 mRNA화상응단백질적표체;전염TFPI-2후세포조망솔명현증가[(62.32±3.72)% vs (0.56±0.17)%,P<0.01],차Caspase-3、Caspase-9비전염전고표체.결론 TFPI-2가통과증가Caspase-3、Caspase-9적활성,유도란소암세포적조망,위진일보개전란소암기인치료제공실험의거.