中华病理学杂志
中華病理學雜誌
중화병이학잡지
Chinese Journal of Pathology
2007年
1期
43-47
,共5页
夏慧玲%刘必成%张晓良%刘殿阁%吴冀宁%张建东%弓玉祥
夏慧玲%劉必成%張曉良%劉殿閣%吳冀寧%張建東%弓玉祥
하혜령%류필성%장효량%류전각%오기저%장건동%궁옥상
肾硬化症%输尿管梗阻%黏蛋白类%肾小管%上皮细胞
腎硬化癥%輸尿管梗阻%黏蛋白類%腎小管%上皮細胞
신경화증%수뇨관경조%점단백류%신소관%상피세포
目的 观察整合素连接激酶(ILK)在单侧输尿管梗阻小鼠(UUO)肾脏中的表达,并探讨其在肾小管上皮细胞转化中的作用.方法 将10周龄健康雄性CD-1小鼠随机分为假手术组(C,n=20)和UUO组(n=40),分别于术后1、3、7、14 d处死小鼠.采用Masson染色观察肾间质纤维化程度;用免疫组织化学(SP法)的方法 观察ILK、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;Western blot半定量分析梗阻侧肾组织ILK的蛋白水平;用即时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测ILK、E-cadherin和α-SMA mRNA的表达.结果 免疫组织化学显示ILK在假手术组只有微量表达,主要位于肾小球脏层上皮细胞,UUO术后1 d ILK蛋白表达显著增多(t=16.5,P＜0.01),7 d达高峰.术后3 d肾小管上皮细胞及肾间质α-SMA阳性细胞数显著增多(t=21.0,P＜0.01),肾小管上皮细胞表达E-cadherin明显减少(t=5.6,P＜0.01).根据免疫组织化学结果 分析,术后1～7 d,ILK蛋白表达与α-SMA蛋白表达呈正相关(R=0.88,＜0.01),与E-cadherin表达呈负相关(R=-0.87,P＜0.01).Western blot结果 显示ILK蛋白表达于术后1 d明显增加,7 d达高峰,14 d表达不再增加(P＞0.05).RT-PCR结果 显示术后l d ILK mRNA表达增多(t=141.6,P＜0.01),E-cadherin mRNA表达于术后3 d显著减少(P＜0.01),α-SMA mRNA表达于术后3 d开始增多(P＜0.01).结论 UUO模型早期整合素连接激酶表达增高,可能通过介导肾小管上皮细胞-间充质转化而参与肾脏纤维化的发生发展.
目的 觀察整閤素連接激酶(ILK)在單側輸尿管梗阻小鼠(UUO)腎髒中的錶達,併探討其在腎小管上皮細胞轉化中的作用.方法 將10週齡健康雄性CD-1小鼠隨機分為假手術組(C,n=20)和UUO組(n=40),分彆于術後1、3、7、14 d處死小鼠.採用Masson染色觀察腎間質纖維化程度;用免疫組織化學(SP法)的方法 觀察ILK、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的錶達;Western blot半定量分析梗阻側腎組織ILK的蛋白水平;用即時熒光逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測ILK、E-cadherin和α-SMA mRNA的錶達.結果 免疫組織化學顯示ILK在假手術組隻有微量錶達,主要位于腎小毬髒層上皮細胞,UUO術後1 d ILK蛋白錶達顯著增多(t=16.5,P＜0.01),7 d達高峰.術後3 d腎小管上皮細胞及腎間質α-SMA暘性細胞數顯著增多(t=21.0,P＜0.01),腎小管上皮細胞錶達E-cadherin明顯減少(t=5.6,P＜0.01).根據免疫組織化學結果 分析,術後1～7 d,ILK蛋白錶達與α-SMA蛋白錶達呈正相關(R=0.88,＜0.01),與E-cadherin錶達呈負相關(R=-0.87,P＜0.01).Western blot結果 顯示ILK蛋白錶達于術後1 d明顯增加,7 d達高峰,14 d錶達不再增加(P＞0.05).RT-PCR結果 顯示術後l d ILK mRNA錶達增多(t=141.6,P＜0.01),E-cadherin mRNA錶達于術後3 d顯著減少(P＜0.01),α-SMA mRNA錶達于術後3 d開始增多(P＜0.01).結論 UUO模型早期整閤素連接激酶錶達增高,可能通過介導腎小管上皮細胞-間充質轉化而參與腎髒纖維化的髮生髮展.
목적 관찰정합소련접격매(ILK)재단측수뇨관경조소서(UUO)신장중적표체,병탐토기재신소관상피세포전화중적작용.방법 장10주령건강웅성CD-1소서수궤분위가수술조(C,n=20)화UUO조(n=40),분별우술후1、3、7、14 d처사소서.채용Masson염색관찰신간질섬유화정도;용면역조직화학(SP법)적방법 관찰ILK、E-개점단백(E-cadherin)화α-평활기기동단백(α-SMA)적표체;Western blot반정량분석경조측신조직ILK적단백수평;용즉시형광역전록취합매련반응(RT-PCR)검측ILK、E-cadherin화α-SMA mRNA적표체.결과 면역조직화학현시ILK재가수술조지유미량표체,주요위우신소구장층상피세포,UUO술후1 d ILK단백표체현저증다(t=16.5,P＜0.01),7 d체고봉.술후3 d신소관상피세포급신간질α-SMA양성세포수현저증다(t=21.0,P＜0.01),신소관상피세포표체E-cadherin명현감소(t=5.6,P＜0.01).근거면역조직화학결과 분석,술후1～7 d,ILK단백표체여α-SMA단백표체정정상관(R=0.88,＜0.01),여E-cadherin표체정부상관(R=-0.87,P＜0.01).Western blot결과 현시ILK단백표체우술후1 d명현증가,7 d체고봉,14 d표체불재증가(P＞0.05).RT-PCR결과 현시술후l d ILK mRNA표체증다(t=141.6,P＜0.01),E-cadherin mRNA표체우술후3 d현저감소(P＜0.01),α-SMA mRNA표체우술후3 d개시증다(P＜0.01).결론 UUO모형조기정합소련접격매표체증고,가능통과개도신소관상피세포-간충질전화이삼여신장섬유화적발생발전.
