中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
2期
59-61
,共3页
张晓楠%陈南春%程司堃%张延凤
張曉楠%陳南春%程司堃%張延鳳
장효남%진남춘%정사곤%장연봉
免疫印迹%辣根过氧化物酶%Western blot%gam蛋白%bet蛋白
免疫印跡%辣根過氧化物酶%Western blot%gam蛋白%bet蛋白
면역인적%랄근과양화물매%Western blot%gam단백%bet단백
目前蛋白免疫印迹显示系统有显色法和化学发光法,因化学发光法具有灵敏、快速、准确等特点而倍受科研工作者的青睐,但一般商品化的化学发光试剂盒价格颇为昂贵,为此,在参考文献的基础上作了一些改进,将Tris-Cl的pH值从7.5提高到11.0,同时提高了对碘苯酚的浓度(从1mmol/L提高到2mmol/L),得到了自制的化学发光试剂.首先用其检测了大肠杆菌中表达的2种不同分子量的蛋白(gam,13kDa;bet,30kDa),发现当蛋白上样量为2～20ng时,各蛋白条带均清晰显示.随后的斑点免疫印迹实验表明:自制及进口化学发光试剂在检测酶标二抗效价方面有着同样高的敏感性.
目前蛋白免疫印跡顯示繫統有顯色法和化學髮光法,因化學髮光法具有靈敏、快速、準確等特點而倍受科研工作者的青睞,但一般商品化的化學髮光試劑盒價格頗為昂貴,為此,在參攷文獻的基礎上作瞭一些改進,將Tris-Cl的pH值從7.5提高到11.0,同時提高瞭對碘苯酚的濃度(從1mmol/L提高到2mmol/L),得到瞭自製的化學髮光試劑.首先用其檢測瞭大腸桿菌中錶達的2種不同分子量的蛋白(gam,13kDa;bet,30kDa),髮現噹蛋白上樣量為2～20ng時,各蛋白條帶均清晰顯示.隨後的斑點免疫印跡實驗錶明:自製及進口化學髮光試劑在檢測酶標二抗效價方麵有著同樣高的敏感性.
목전단백면역인적현시계통유현색법화화학발광법,인화학발광법구유령민、쾌속、준학등특점이배수과연공작자적청래,단일반상품화적화학발광시제합개격파위앙귀,위차,재삼고문헌적기출상작료일사개진,장Tris-Cl적pH치종7.5제고도11.0,동시제고료대전분분적농도(종1mmol/L제고도2mmol/L),득도료자제적화학발광시제.수선용기검측료대장간균중표체적2충불동분자량적단백(gam,13kDa;bet,30kDa),발현당단백상양량위2～20ng시,각단백조대균청석현시.수후적반점면역인적실험표명:자제급진구화학발광시제재검측매표이항효개방면유착동양고적민감성.
