抗TfR单链抗体-AP融合蛋白的构建、表达与鉴定
항TfR단련항체-AP융합단백적구건、표체여감정
Construction, Expression and Characterization of scFv-AP Fusion Protein against Transferrin Receptor
  • 万方数据
    医学分子生物学杂志 의학분자생물학잡지
    FOREIGN MEDICAL SCIENCES
    2006年 4期 260-262 ,共3页

    肖代雯%黄宇%沈昕%邢薇%刁智娟%刘静%雷萍%陶娟%沈关心

    초대문%황우%침흔%형미%조지연%류정%뢰평%도연%침관심

    转铁蛋白受体%单链抗体%碱性磷酸酶%融合蛋白 轉鐵蛋白受體%單鏈抗體%堿性燐痠酶%融閤蛋白
    전철단백수체%단련항체%감성린산매%융합단백
    目的 构建、表达和鉴定抗转铁蛋白受体(TfR)单链抗体--碱性磷酸酶(AP)融合蛋白.方法 用SfiⅠ和Not Ⅰ分别酶切抗转铁蛋白受体scFv表达质粒pUC19/119,获得scFv基因,直接亚克隆到表达载体pDAP2中,在TG1菌中表达scFv-AP融合蛋白,SDS-PAGE分析scFv-AP的分子量,酶免疫测定鉴定其抗体和酶活性.结果 scFv-AP融合蛋白表达载体经scFv特异性引物PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳可见约700 bp条带,符合scFv基因理论值大小,IPTG诱导产物经SDS-PAGE分析可见约为75ku的蛋白条带,符合scFv-AP融合蛋白分子量的理论值大小,直接细胞ELISA测定证明表达产物scFv-AP融合蛋白具有结合人TfR和AP活性的双重功效.结论 抗人scFv-AP融合蛋白表达载体构建成功,表达产物具有结合人TfR和AP活性的双重功效,为其临床检测应用奠定了基础.
    목적 구건、표체화감정항전철단백수체(TfR)단련항체--감성린산매(AP)융합단백.방법 용SfiⅠ화Not Ⅰ분별매절항전철단백수체scFv표체질립pUC19/119,획득scFv기인,직접아극륭도표체재체pDAP2중,재TG1균중표체scFv-AP융합단백,SDS-PAGE분석scFv-AP적분자량,매면역측정감정기항체화매활성.결과 scFv-AP융합단백표체재체경scFv특이성인물PCR확증,확증산물경경지당응효전영가견약700 bp조대,부합scFv기인이론치대소,IPTG유도산물경SDS-PAGE분석가견약위75ku적단백조대,부합scFv-AP융합단백분자량적이론치대소,직접세포ELISA측정증명표체산물scFv-AP융합단백구유결합인TfR화AP활성적쌍중공효.결론 항인scFv-AP융합단백표체재체구건성공,표체산물구유결합인TfR화AP활성적쌍중공효,위기림상검측응용전정료기출.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문