生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
483-486
,共4页
李招发%于学玲%黄金路%方宏清%陈惠鹏
李招髮%于學玲%黃金路%方宏清%陳惠鵬
리초발%우학령%황금로%방굉청%진혜붕
半赤酵母%重组巴曲酶%蛇毒类凝血酶%止血剂
半赤酵母%重組巴麯酶%蛇毒類凝血酶%止血劑
반적효모%중조파곡매%사독류응혈매%지혈제
以毕赤酵母为表达系统,建立生产重组巴曲酶的技术工艺路线.通过递归式PCR的方法,人工合成了巴曲酶基因,将其插入pPIC9表达质粒中,转化至毕赤酵母GS115(hia4),筛选出的表达株经甲醇诱导,表达了重组巴曲酶,并得以纯化.从每升发酵液中可纯化得到10 mg重组巴曲酶,其比活为238 NIH units/mg,分子量为30.55kD.重组巴曲酶在体外可使纤维蛋白凝固,在体内缩短小鼠出血时间.为开发重组的蛇毒类凝血酶止血剂打下了基础.
以畢赤酵母為錶達繫統,建立生產重組巴麯酶的技術工藝路線.通過遞歸式PCR的方法,人工閤成瞭巴麯酶基因,將其插入pPIC9錶達質粒中,轉化至畢赤酵母GS115(hia4),篩選齣的錶達株經甲醇誘導,錶達瞭重組巴麯酶,併得以純化.從每升髮酵液中可純化得到10 mg重組巴麯酶,其比活為238 NIH units/mg,分子量為30.55kD.重組巴麯酶在體外可使纖維蛋白凝固,在體內縮短小鼠齣血時間.為開髮重組的蛇毒類凝血酶止血劑打下瞭基礎.
이필적효모위표체계통,건립생산중조파곡매적기술공예로선.통과체귀식PCR적방법,인공합성료파곡매기인,장기삽입pPIC9표체질립중,전화지필적효모GS115(hia4),사선출적표체주경갑순유도,표체료중조파곡매,병득이순화.종매승발효액중가순화득도10 mg중조파곡매,기비활위238 NIH units/mg,분자량위30.55kD.중조파곡매재체외가사섬유단백응고,재체내축단소서출혈시간.위개발중조적사독류응혈매지혈제타하료기출.
