CAJ | 학술논문

马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)长末端重复序列(Longterminal repeat,LTR)是基因组中高度变异区之一,EIAV LTR的变异对于指导病毒的复制和病毒致病性具有重要的生物学意义.为了阐明我国马传染性贫血病毒弱毒疫苗毒力致弱的分子机制,由马传贫强毒至弱毒致弱过程中不同代次毒株LTR序列的分析,以驴胎皮肤弱毒株疫苗全长感染性克隆pLGFD3-8为父本,选取LTR R区的TAR起始碱基,poly(A)附加位点,采用反向遗传操作对其位点进行PCR体外定点突变,将弱毒序列构建的逆向点突变型全基因克隆转染到驴胎皮肤细胞(FDD)并在FDD上传代,通过逆转录酶活性(RT)检测、RT-PCR方法及real-timeRT PCR检测并验证其感染性.检测结果为构建的逆向点突变型感染性克隆在FDD上被拯救,其衍生病毒感染的FDD上出现明显的细胞病变;细胞培养上清可检测到RT酶活性和RT-PCR阳性;电镜下可见大量典型的EIAV颗粒.pLGFD-M点突变型嵌合克隆衍生病毒与其父本克隆衍生病毒pLGFD3-8复制水平相似.此结果为进一步深入研究LTR对马传染性贫血病毒复制水平和毒力的影响奠定了基础.
마전염성빈혈병독(Equine infectious anemia virus,EIAV)장말단중복서렬(Longterminal repeat,LTR)시기인조중고도변이구지일,EIAV LTR적변이대우지도병독적복제화병독치병성구유중요적생물학의의.위료천명아국마전염성빈혈병독약독역묘독력치약적분자궤제,유마전빈강독지약독치약과정중불동대차독주LTR서렬적분석,이려태피부약독주역묘전장감염성극륭pLGFD3-8위부본,선취LTR R구적TAR기시감기,poly(A)부가위점,채용반향유전조작대기위점진행PCR체외정점돌변,장약독서렬구건적역향점돌변형전기인극륭전염도려태피부세포(FDD)병재FDD상전대,통과역전록매활성(RT)검측、RT-PCR방법급real-timeRT PCR검측병험증기감염성.검측결과위구건적역향점돌변형감염성극륭재FDD상피증구,기연생병독감염적FDD상출현명현적세포병변;세포배양상청가검측도RT매활성화RT-PCR양성;전경하가견대량전형적EIAV과립.pLGFD-M점돌변형감합극륭연생병독여기부본극륭연생병독pLGFD3-8복제수평상사.차결과위진일보심입연구LTR대마전염성빈혈병독복제수평화독력적영향전정료기출.