生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
3期
346-349
,共4页
郭向飞%金敏%陈照立%李君文
郭嚮飛%金敏%陳照立%李君文
곽향비%금민%진조립%리군문
胎肝干细胞%分离鉴定%mRNA转录
胎肝榦細胞%分離鑒定%mRNA轉錄
태간간세포%분리감정%mRNA전록
目的:探讨体外大量扩增培养人胎肝干细胞的方法,研究其形态、特性及mRNA转录情况.方法:采用两步灌流法结合链霉蛋白酶消化及Percoll密度梯度离心法分离12~20周胎龄的胎肝细胞,采用免疫细胞化学染色及RT-PCR方法对分离培养的细胞进行鉴定分析.结果:刚分离的细胞活力在80%以上,原代培养3 d开始出现小细胞团,2周后即形成肉眼可见的细胞集落,细胞体积小,核质比大;原代、传代培养的胎肝细胞甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19)、卵圆标记蛋白OV-6、细胞分化抗原34免疫染色阳性;RT-PCR分析证明胎肝干细胞中AFP、白蛋白、CK19、CK18和八聚体结合蛋白(OCT)-4 mRNA的表达.结论:分离了胎肝干细胞,具有肝细胞、胆管细胞及干细胞表面标志及相应的基因表达,为进一步的基础研究奠定了基础.
目的:探討體外大量擴增培養人胎肝榦細胞的方法,研究其形態、特性及mRNA轉錄情況.方法:採用兩步灌流法結閤鏈黴蛋白酶消化及Percoll密度梯度離心法分離12~20週胎齡的胎肝細胞,採用免疫細胞化學染色及RT-PCR方法對分離培養的細胞進行鑒定分析.結果:剛分離的細胞活力在80%以上,原代培養3 d開始齣現小細胞糰,2週後即形成肉眼可見的細胞集落,細胞體積小,覈質比大;原代、傳代培養的胎肝細胞甲胎蛋白(AFP)、細胞角蛋白19(CK19)、卵圓標記蛋白OV-6、細胞分化抗原34免疫染色暘性;RT-PCR分析證明胎肝榦細胞中AFP、白蛋白、CK19、CK18和八聚體結閤蛋白(OCT)-4 mRNA的錶達.結論:分離瞭胎肝榦細胞,具有肝細胞、膽管細胞及榦細胞錶麵標誌及相應的基因錶達,為進一步的基礎研究奠定瞭基礎.
목적:탐토체외대량확증배양인태간간세포적방법,연구기형태、특성급mRNA전록정황.방법:채용량보관류법결합련매단백매소화급Percoll밀도제도리심법분리12~20주태령적태간세포,채용면역세포화학염색급RT-PCR방법대분리배양적세포진행감정분석.결과:강분리적세포활력재80%이상,원대배양3 d개시출현소세포단,2주후즉형성육안가견적세포집락,세포체적소,핵질비대;원대、전대배양적태간세포갑태단백(AFP)、세포각단백19(CK19)、란원표기단백OV-6、세포분화항원34면역염색양성;RT-PCR분석증명태간간세포중AFP、백단백、CK19、CK18화팔취체결합단백(OCT)-4 mRNA적표체.결론:분리료태간간세포,구유간세포、담관세포급간세포표면표지급상응적기인표체,위진일보적기출연구전정료기출.