CAJ | 학술논문

目的:探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对脑胶质瘤细胞U87-MG自噬性死亡的影响.方法:CsA联合ATO作用U87-MG细胞后,应用MTT法检测细胞的存活率及ATO半数抑制浓度(half inhibition concentration, IC50),FCM法检测细胞周期的改变,荧光显微镜下观察及FCM法定量分析经吖啶橙(acridine orange,AO)活体染色后细胞质内酸性自噬泡(acidic vesicular organelles,AVO)的形成情况;Western印迹法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1和自噬标志蛋白LC3-Ⅱ的表达水平.结果:小剂量CsA (2 μmol/L)联合ATO可明显抑制U87-MG细胞的生长,CsA可增加ATO诱导的细胞自噬性死亡,使ATO的IC50值由单独作用时的4.28 μmol/L降低至联合作用时的1.28 μmol/L;与对照组相比,CsA联合ATO作用后G2/M期细胞明显减少(P<0.05);AO活体染色可见,CsA联合ATO作用可显著增加细胞内的AVO形成,与CsA、ATO单独作用组相比差异有统计学意义(P<0.01); Western印迹可见CsA联合ATO作用后细胞内Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的表达明显上调,与对照组和单独作用组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:CsA可以增强ATO诱导的恶性脑胶质瘤细胞U87-MG的自噬性死亡,为恶性脑胶质瘤的治疗提供新的方向.
목적:탐토배포소A(cyclosporine A,CsA)연합삼양화이신(arsenic trioxide,ATO)대뇌효질류세포U87-MG자서성사망적영향.방법:CsA연합ATO작용U87-MG세포후,응용MTT법검측세포적존활솔급ATO반수억제농도(half inhibition concentration, IC50),FCM법검측세포주기적개변,형광현미경하관찰급FCM법정량분석경아정등(acridine orange,AO)활체염색후세포질내산성자서포(acidic vesicular organelles,AVO)적형성정황;Western인적법검측세포자서상관단백Beclin-1화자서표지단백LC3-Ⅱ적표체수평.결과:소제량CsA (2 μmol/L)연합ATO가명현억제U87-MG세포적생장,CsA가증가ATO유도적세포자서성사망,사ATO적IC50치유단독작용시적4.28 μmol/L강저지연합작용시적1.28 μmol/L;여대조조상비,CsA연합ATO작용후G2/M기세포명현감소(P<0.05);AO활체염색가견,CsA연합ATO작용가현저증가세포내적AVO형성,여CsA、ATO단독작용조상비차이유통계학의의(P<0.01); Western인적가견CsA연합ATO작용후세포내Beclin-1화LC3-Ⅱ단백적표체명현상조,여대조조화단독작용조비교차이유통계학의의(P<0.05).결론:CsA가이증강ATO유도적악성뇌효질류세포U87-MG적자서성사망,위악성뇌효질류적치료제공신적방향.