中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
10期
63-67
,共5页
黄翠琴%陈宏惠%黄其春%陈星星%郑新添
黃翠琴%陳宏惠%黃其春%陳星星%鄭新添
황취금%진굉혜%황기춘%진성성%정신첨
猪蛔虫%感染相关基因%RNA干扰%功能
豬蛔蟲%感染相關基因%RNA榦擾%功能
저회충%감염상관기인%RNA간우%공능
为寻找猪蛔虫免疫防治的"关键"靶分子,从已构建的猪蛔虫感染期幼虫消减cDNA文库中筛选了一感染相关基因(EST编号为07E12),采用RNA干扰(RNAi)技术对该基因的功能进行了初步探讨.针对其EST序列设计了1对特异引物,体外转录合成双链RNA(dsRNA)后,通过浸泡的方式将dsRNA导入猪蛔虫感染期幼虫中,在浸泡后的4个不同时间点采用RT-PCR方法检测虫体浸泡后靶基因被干扰的效果.试验结果表明,在浸泡后24、48、72 h都检测到了相对应基因表达的存在,但表达量随时间依次减少,96 h之后试验组没有检测到07E12的相应RNA的表达,提示dsRNA进入虫体并逐渐发挥了干扰作用,说明该基因在猪蛔虫幼虫感染宿主的过程中可能扮演重要角色.
為尋找豬蛔蟲免疫防治的"關鍵"靶分子,從已構建的豬蛔蟲感染期幼蟲消減cDNA文庫中篩選瞭一感染相關基因(EST編號為07E12),採用RNA榦擾(RNAi)技術對該基因的功能進行瞭初步探討.針對其EST序列設計瞭1對特異引物,體外轉錄閤成雙鏈RNA(dsRNA)後,通過浸泡的方式將dsRNA導入豬蛔蟲感染期幼蟲中,在浸泡後的4箇不同時間點採用RT-PCR方法檢測蟲體浸泡後靶基因被榦擾的效果.試驗結果錶明,在浸泡後24、48、72 h都檢測到瞭相對應基因錶達的存在,但錶達量隨時間依次減少,96 h之後試驗組沒有檢測到07E12的相應RNA的錶達,提示dsRNA進入蟲體併逐漸髮揮瞭榦擾作用,說明該基因在豬蛔蟲幼蟲感染宿主的過程中可能扮縯重要角色.
위심조저회충면역방치적"관건"파분자,종이구건적저회충감염기유충소감cDNA문고중사선료일감염상관기인(EST편호위07E12),채용RNA간우(RNAi)기술대해기인적공능진행료초보탐토.침대기EST서렬설계료1대특이인물,체외전록합성쌍련RNA(dsRNA)후,통과침포적방식장dsRNA도입저회충감염기유충중,재침포후적4개불동시간점채용RT-PCR방법검측충체침포후파기인피간우적효과.시험결과표명,재침포후24、48、72 h도검측도료상대응기인표체적존재,단표체량수시간의차감소,96 h지후시험조몰유검측도07E12적상응RNA적표체,제시dsRNA진입충체병축점발휘료간우작용,설명해기인재저회충유충감염숙주적과정중가능분연중요각색.
