CAJ | 학술논문

背景:血管内皮钙黏附素(VE-cad)作为血管生成拟态的重要调控分子在多种高侵袭性肿瘤中均存在表达,参与肿瘤的发生、发展过程.前期研究发现食管鳞癌细胞中亦存在VE-cad表达.目的:探讨微小RNA(miRNA)干扰技术下调VE-cad对食管鳞癌细胞血管生成拟态形成、细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法:将已成功构建的VE-cad miRNA干扰质粒稳定转染Eca109、TE13细胞,同时设置阴性对照组(转染空质粒)和空白对照组(未转染).荧光显微镜观察单克隆转染效率,三维培养观察细胞管腔样结构形成的能力,RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA和蛋白表达,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡.结果:荧光显微镜显示Eca109、TE13细胞稳定转染效率均达90％以上.与阴性对照组和空白对照组相比,干扰组细胞管腔样结构数目明显减少(P＜0.01),VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA和蛋白表达明显受抑(P＜0.01),细胞增殖能力明显下降(P＜0.05),凋亡率明显增高(P＜0.05).结论:miRNA干扰技术能有效抑制食管鳞癌细胞Eca109、TE13的VE-cad表达.VE-cad通过下调EphA2和LN5γ2表达抑制血管生成拟态的体外形成,并影响细胞增殖和凋亡.VE-cad 可能成为食管鳞癌分子靶向治疗的新靶点.
배경:혈관내피개점부소(VE-cad)작위혈관생성의태적중요조공분자재다충고침습성종류중균존재표체,삼여종류적발생、발전과정.전기연구발현식관린암세포중역존재VE-cad표체.목적:탐토미소RNA(miRNA)간우기술하조VE-cad대식관린암세포혈관생성의태형성、세포증식화조망적영향급기가능궤제.방법:장이성공구건적VE-cad miRNA간우질립은정전염Eca109、TE13세포,동시설치음성대조조(전염공질립)화공백대조조(미전염).형광현미경관찰단극륭전염효솔,삼유배양관찰세포관강양결구형성적능력,RT-PCR화단백질인적법분별검측VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA화단백표체,MTT법화류식세포술분별검측세포증식화조망.결과:형광현미경현시Eca109、TE13세포은정전염효솔균체90％이상.여음성대조조화공백대조조상비,간우조세포관강양결구수목명현감소(P＜0.01),VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA화단백표체명현수억(P＜0.01),세포증식능력명현하강(P＜0.05),조망솔명현증고(P＜0.05).결론:miRNA간우기술능유효억제식관린암세포Eca109、TE13적VE-cad표체.VE-cad통과하조EphA2화LN5γ2표체억제혈관생성의태적체외형성,병영향세포증식화조망.VE-cad 가능성위식관린암분자파향치료적신파점.