眼视光学杂志
眼視光學雜誌
안시광학잡지
CHINESE JOURNAL OF OPTOMEY & OPHTHALMOLOGY
2007年
3期
175-178
,共4页
马慧香%徐锦堂%姜振友%张穗梅%陈建苏%赵松滨
馬慧香%徐錦堂%薑振友%張穗梅%陳建囌%趙鬆濱
마혜향%서금당%강진우%장수매%진건소%조송빈
转化生长因子-βl%基因转染%细胞因子%免疫
轉化生長因子-βl%基因轉染%細胞因子%免疫
전화생장인자-βl%기인전염%세포인자%면역
目的 探讨转化生长因子一β1(tromsforming growth factor-β1,,TGF-β1)基因转染角膜内皮细胞后表达产物对小鼠脾脏淋巴细胞细胞因子表达的调控作用.方法 利用脂质体介导法将TGF-β1基因转染入培养的兔角膜内皮细胞中,并用药物筛选抗性细胞克隆.用免疫组化法检测外源基因的稳定表达.ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β1表达量,用RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6 mRNA的表达.结果 免疫组化染色显示基因转染后筛选出的克隆细胞TGF-β1蛋白表达均为阳性,胞浆呈棕色着色.转染细胞培养上清中TGF-β1的表达量为(597±7)pg/ml,高于对照组.基因转染组淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-αmRNA的表达量明显低于正常对照组(P＜0.05);IL-4、II-6 mRNA的表达量明显高于正常对照组(P＜0.051.结论 TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后高表达TGF-β1,致使淋巴细胞发生免疫偏离,作为组织工程角膜种子细胞移植后具有抑制角膜移植免疫排斥反应的潜在可能性.
目的 探討轉化生長因子一β1(tromsforming growth factor-β1,,TGF-β1)基因轉染角膜內皮細胞後錶達產物對小鼠脾髒淋巴細胞細胞因子錶達的調控作用.方法 利用脂質體介導法將TGF-β1基因轉染入培養的兔角膜內皮細胞中,併用藥物篩選抗性細胞剋隆.用免疫組化法檢測外源基因的穩定錶達.ELISA法檢測轉染細胞培養上清中TGF-β1錶達量,用RT-PCR檢測小鼠脾髒淋巴細胞IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6 mRNA的錶達.結果 免疫組化染色顯示基因轉染後篩選齣的剋隆細胞TGF-β1蛋白錶達均為暘性,胞漿呈棕色著色.轉染細胞培養上清中TGF-β1的錶達量為(597±7)pg/ml,高于對照組.基因轉染組淋巴細胞IL-2、IFN-γ、TNF-αmRNA的錶達量明顯低于正常對照組(P＜0.05);IL-4、II-6 mRNA的錶達量明顯高于正常對照組(P＜0.051.結論 TGF-β1基因轉染角膜內皮細胞後高錶達TGF-β1,緻使淋巴細胞髮生免疫偏離,作為組織工程角膜種子細胞移植後具有抑製角膜移植免疫排斥反應的潛在可能性.
목적 탐토전화생장인자일β1(tromsforming growth factor-β1,,TGF-β1)기인전염각막내피세포후표체산물대소서비장림파세포세포인자표체적조공작용.방법 이용지질체개도법장TGF-β1기인전염입배양적토각막내피세포중,병용약물사선항성세포극륭.용면역조화법검측외원기인적은정표체.ELISA법검측전염세포배양상청중TGF-β1표체량,용RT-PCR검측소서비장림파세포IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6 mRNA적표체.결과 면역조화염색현시기인전염후사선출적극륭세포TGF-β1단백표체균위양성,포장정종색착색.전염세포배양상청중TGF-β1적표체량위(597±7)pg/ml,고우대조조.기인전염조림파세포IL-2、IFN-γ、TNF-αmRNA적표체량명현저우정상대조조(P＜0.05);IL-4、II-6 mRNA적표체량명현고우정상대조조(P＜0.051.결론 TGF-β1기인전염각막내피세포후고표체TGF-β1,치사림파세포발생면역편리,작위조직공정각막충자세포이식후구유억제각막이식면역배척반응적잠재가능성.
