生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2004年
2期
159-163
,共5页
石奕武%胡维新%罗赛群%江元山%易伟峰%谭达人%沈熔
石奕武%鬍維新%囉賽群%江元山%易偉峰%譚達人%瀋鎔
석혁무%호유신%라새군%강원산%역위봉%담체인%침용
DAZAP2%表达下调%原核表达%抗体
DAZAP2%錶達下調%原覈錶達%抗體
DAZAP2%표체하조%원핵표체%항체
为了进一步从蛋白水平上检测DAZAP2(deletedinazoospermiaassociatedprotein2)在多发性骨髓瘤患者中的表达及研究DAZAP2的功能,以正常人的骨髓单个核细胞的总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZAP2完整编码序列,构建原核表达重组质粒pQE30-DAZAP2,转化大肠杆菌JM109后,加IPTG诱导表达4h时,表达蛋白显著增加,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,以该纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DAZAP2抗体,ELISA检测抗体的效价在1:6400以上,Westernblot检测抗体的特异性较好.用该抗体检测出DAZAP2在6例正常人及4例多发性骨髓瘤患者中有表达,其他7例患者中没有表达,与RT-PCR结果一致,该抗体具有一定的临床应用前景,并能进一步用于功能研究.
為瞭進一步從蛋白水平上檢測DAZAP2(deletedinazoospermiaassociatedprotein2)在多髮性骨髓瘤患者中的錶達及研究DAZAP2的功能,以正常人的骨髓單箇覈細胞的總RNA為模闆,RT-PCR擴增DAZAP2完整編碼序列,構建原覈錶達重組質粒pQE30-DAZAP2,轉化大腸桿菌JM109後,加IPTG誘導錶達4h時,錶達蛋白顯著增加,Ni-NTA層析柱純化蛋白,以該純化蛋白免疫新西蘭大白兔,製備抗DAZAP2抗體,ELISA檢測抗體的效價在1:6400以上,Westernblot檢測抗體的特異性較好.用該抗體檢測齣DAZAP2在6例正常人及4例多髮性骨髓瘤患者中有錶達,其他7例患者中沒有錶達,與RT-PCR結果一緻,該抗體具有一定的臨床應用前景,併能進一步用于功能研究.
위료진일보종단백수평상검측DAZAP2(deletedinazoospermiaassociatedprotein2)재다발성골수류환자중적표체급연구DAZAP2적공능,이정상인적골수단개핵세포적총RNA위모판,RT-PCR확증DAZAP2완정편마서렬,구건원핵표체중조질립pQE30-DAZAP2,전화대장간균JM109후,가IPTG유도표체4h시,표체단백현저증가,Ni-NTA층석주순화단백,이해순화단백면역신서란대백토,제비항DAZAP2항체,ELISA검측항체적효개재1:6400이상,Westernblot검측항체적특이성교호.용해항체검측출DAZAP2재6례정상인급4례다발성골수류환자중유표체,기타7례환자중몰유표체,여RT-PCR결과일치,해항체구유일정적림상응용전경,병능진일보용우공능연구.
