微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2004年
3期
315-318
,共4页
韩黎%吴桂芝%朱世俊%陈运奇%陈世平
韓黎%吳桂芝%硃世俊%陳運奇%陳世平
한려%오계지%주세준%진운기%진세평
磷脂酶D1%腺病毒%同源重组
燐脂酶D1%腺病毒%同源重組
린지매D1%선병독%동원중조
将磷脂酶D1基因及其功能缺陷点突变基因从真核表达载体pCGN-PLD1亚克隆至带有绿色荧光标记蛋白的穿梭质粒pAdTrack-CMV中;再与腺病毒骨架载体一起在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组;阳性重组子经PacⅠ线性化后,转染入病毒组装细胞系293细胞,成功构建磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D1重组腺病毒; 并用该病毒颗粒感染嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞,高效表达磷脂酶D1蛋白.证明大蛋白基因,如磷脂酶D1基因的同源重组腺病毒表达构建切实可行,为研究其在细胞内的生理功能提供了有力工具.
將燐脂酶D1基因及其功能缺陷點突變基因從真覈錶達載體pCGN-PLD1亞剋隆至帶有綠色熒光標記蛋白的穿梭質粒pAdTrack-CMV中;再與腺病毒骨架載體一起在大腸桿菌BJ5183中進行同源重組;暘性重組子經PacⅠ線性化後,轉染入病毒組裝細胞繫293細胞,成功構建燐脂酰膽堿專一性燐脂酶D1重組腺病毒; 併用該病毒顆粒感染嗜鉻細胞瘤細胞PC12細胞,高效錶達燐脂酶D1蛋白.證明大蛋白基因,如燐脂酶D1基因的同源重組腺病毒錶達構建切實可行,為研究其在細胞內的生理功能提供瞭有力工具.
장린지매D1기인급기공능결함점돌변기인종진핵표체재체pCGN-PLD1아극륭지대유록색형광표기단백적천사질립pAdTrack-CMV중;재여선병독골가재체일기재대장간균BJ5183중진행동원중조;양성중조자경PacⅠ선성화후,전염입병독조장세포계293세포,성공구건린지선담감전일성린지매D1중조선병독; 병용해병독과립감염기락세포류세포PC12세포,고효표체린지매D1단백.증명대단백기인,여린지매D1기인적동원중조선병독표체구건절실가행,위연구기재세포내적생리공능제공료유력공구.
