蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2005年
3期
268-272
,共5页
张苗%张耀洲%张文波%金勇丰%蓝航莲
張苗%張耀洲%張文波%金勇豐%藍航蓮
장묘%장요주%장문파%금용봉%람항련
家蚕%胰凝乳蛋白酶抑制剂%原核表达
傢蠶%胰凝乳蛋白酶抑製劑%原覈錶達
가잠%이응유단백매억제제%원핵표체
为进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的功能和作用机理,利用RT-PCR技术,从家蚕总RNA中扩增到家蚕SCI-SB基因片段,构建了含有GST标签的融合表达质粒pGEX4T-1-SCI-SB.采用pGEX融合蛋白表达系统,在大肠杆菌BL21中得到以包涵体形式存在的重组GST融合蛋白质,表达量可占菌体蛋白的 15%.将包涵体变性、复性处理以后,进一步利用GSTTrapFF 亲合层析一步获得了重组蛋白.将该重组蛋白免疫新西兰纯种大白兔,获得效价高的多克隆抗体.胰凝乳蛋白酶活性抑制实验结果表明该重组蛋白具有一定的酶活抑制作用.
為進一步研究傢蠶胰凝乳蛋白酶抑製劑基因SCI-SB的功能和作用機理,利用RT-PCR技術,從傢蠶總RNA中擴增到傢蠶SCI-SB基因片段,構建瞭含有GST標籤的融閤錶達質粒pGEX4T-1-SCI-SB.採用pGEX融閤蛋白錶達繫統,在大腸桿菌BL21中得到以包涵體形式存在的重組GST融閤蛋白質,錶達量可佔菌體蛋白的 15%.將包涵體變性、複性處理以後,進一步利用GSTTrapFF 親閤層析一步穫得瞭重組蛋白.將該重組蛋白免疫新西蘭純種大白兔,穫得效價高的多剋隆抗體.胰凝乳蛋白酶活性抑製實驗結果錶明該重組蛋白具有一定的酶活抑製作用.
위진일보연구가잠이응유단백매억제제기인SCI-SB적공능화작용궤리,이용RT-PCR기술,종가잠총RNA중확증도가잠SCI-SB기인편단,구건료함유GST표첨적융합표체질립pGEX4T-1-SCI-SB.채용pGEX융합단백표체계통,재대장간균BL21중득도이포함체형식존재적중조GST융합단백질,표체량가점균체단백적 15%.장포함체변성、복성처리이후,진일보이용GSTTrapFF 친합층석일보획득료중조단백.장해중조단백면역신서란순충대백토,획득효개고적다극륭항체.이응유단백매활성억제실험결과표명해중조단백구유일정적매활억제작용.
