解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2007年
2期
100-103
,共4页
张华%边惠洁%尉丁%李亚琳%杨滨%陈志南
張華%邊惠潔%尉丁%李亞琳%楊濱%陳誌南
장화%변혜길%위정%리아림%양빈%진지남
新城疫病毒%血凝素-神经氨酸酶基因%转染%基因表达
新城疫病毒%血凝素-神經氨痠酶基因%轉染%基因錶達
신성역병독%혈응소-신경안산매기인%전염%기인표체
目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.
目的 構建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神經氨痠酶(HN)基因的真覈錶達載體併進行產物錶達.方法 採用RT-PCR法從病毒RNA中剋隆HN cDNA,併構建HN的真覈錶達載體pcDNA3.1-HN,脂質體法轉染CHO-K1,G418篩選穩定錶達剋隆.用Western blot、免疫熒光法檢測HN蛋白的錶達.結果 經限製性酶切鑒定及DNA測序分析,證實真覈錶達載體pcDNA3.1-HN構建正確.Western blot和免疫熒光分析錶明HN基因在CHO-K1中成功錶達.結論 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功剋隆,所構建的真覈錶達載體pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1細胞中穩定錶達.
목적 구건천연용류형신성역병독(NDV)Italien주혈응소-신경안산매(HN)기인적진핵표체재체병진행산물표체.방법 채용RT-PCR법종병독RNA중극륭HN cDNA,병구건HN적진핵표체재체pcDNA3.1-HN,지질체법전염CHO-K1,G418사선은정표체극륭.용Western blot、면역형광법검측HN단백적표체.결과 경한제성매절감정급DNA측서분석,증실진핵표체재체pcDNA3.1-HN구건정학.Western blot화면역형광분석표명HN기인재CHO-K1중성공표체.결론 천연용류형NDV Italien주적HN cDNA피성공극륭,소구건적진핵표체재체pcDNA3.1-HN가이재CHO-K1세포중은정표체.
