中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2008年
7期
869-872
,共4页
李君君%颜家运%刘劼%黄丽芳
李君君%顏傢運%劉劼%黃麗芳
리군군%안가운%류할%황려방
RNA干扰%基因bc1-2%细胞系%K562
RNA榦擾%基因bc1-2%細胞繫%K562
RNA간우%기인bc1-2%세포계%K562
目的 构建bd-2shRNA表达载体,观察其在人白血病K562细胞系中对bc1-2基因的干扰作用.方法 设计合成有短发夹结构靶位bc1-2基因的65个碱基的寡核苷酸,连接到载体pSIR.EN-Shuttle(pSS),构建了bcl-2shRNA表达载体,得到重组质粒pss-shbcl-2-1、pSS-shbcl-2-2、pSS-shbc1-2-3和一个阴性对照,将其稳定转染K562细胞,分别用RT-PCR、Western-blot法检测转染后K562细胞bc1-2 mRNA及蛋白质表达水平. 结果 成功构建了bd-2shRNA的表达载体,并筛选到转染后K562细胞在pSS-shbc1-2-3组bd-2基因的mRNA和蛋白质表达水平明显抑制.结论 特异性的bci-2shRNA可以干扰K562细胞中bd-2基因的表达,针对bc1-2基因不同位点的不同shRNA也有干扰效果的差异.
目的 構建bd-2shRNA錶達載體,觀察其在人白血病K562細胞繫中對bc1-2基因的榦擾作用.方法 設計閤成有短髮夾結構靶位bc1-2基因的65箇堿基的寡覈苷痠,連接到載體pSIR.EN-Shuttle(pSS),構建瞭bcl-2shRNA錶達載體,得到重組質粒pss-shbcl-2-1、pSS-shbcl-2-2、pSS-shbc1-2-3和一箇陰性對照,將其穩定轉染K562細胞,分彆用RT-PCR、Western-blot法檢測轉染後K562細胞bc1-2 mRNA及蛋白質錶達水平. 結果 成功構建瞭bd-2shRNA的錶達載體,併篩選到轉染後K562細胞在pSS-shbc1-2-3組bd-2基因的mRNA和蛋白質錶達水平明顯抑製.結論 特異性的bci-2shRNA可以榦擾K562細胞中bd-2基因的錶達,針對bc1-2基因不同位點的不同shRNA也有榦擾效果的差異.
목적 구건bd-2shRNA표체재체,관찰기재인백혈병K562세포계중대bc1-2기인적간우작용.방법 설계합성유단발협결구파위bc1-2기인적65개감기적과핵감산,련접도재체pSIR.EN-Shuttle(pSS),구건료bcl-2shRNA표체재체,득도중조질립pss-shbcl-2-1、pSS-shbcl-2-2、pSS-shbc1-2-3화일개음성대조,장기은정전염K562세포,분별용RT-PCR、Western-blot법검측전염후K562세포bc1-2 mRNA급단백질표체수평. 결과 성공구건료bd-2shRNA적표체재체,병사선도전염후K562세포재pSS-shbc1-2-3조bd-2기인적mRNA화단백질표체수평명현억제.결론 특이성적bci-2shRNA가이간우K562세포중bd-2기인적표체,침대bc1-2기인불동위점적불동shRNA야유간우효과적차이.
