中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
9期
1023-1027
,共5页
张瑞平%刁有祥%张伟%杜爱庆%刘方娜%臧大鹏
張瑞平%刁有祥%張偉%杜愛慶%劉方娜%臧大鵬
장서평%조유상%장위%두애경%류방나%장대붕
胸膜肺炎放线杆菌%蛋白酶%分离纯化%特性分析
胸膜肺炎放線桿菌%蛋白酶%分離純化%特性分析
흉막폐염방선간균%단백매%분리순화%특성분석
将血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)山东分离株接种含0.2%NAD的LB液体培养基,37℃培养48 h后,经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素离子交换层析、葡聚糖凝胶分子筛层析,从其培养上清液中分离纯化了1种蛋白酶.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,APP蛋白酶含有相对分子质量约为45 000的亚单位.以酪蛋白为底物测得该酶的最适PH值为7.5.最适温度为45℃;该酶对热有一定的稳定性,80℃加热30 min仍保留部分活性;乙二胺四乙酸(EDTA)可抑制其活性,而苯甲基磺酰氟(PMSF)对其无影响.
將血清7型豬胸膜肺炎放線桿菌(APP)山東分離株接種含0.2%NAD的LB液體培養基,37℃培養48 h後,經硫痠銨鹽析、DEAE-纖維素離子交換層析、葡聚糖凝膠分子篩層析,從其培養上清液中分離純化瞭1種蛋白酶.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示,APP蛋白酶含有相對分子質量約為45 000的亞單位.以酪蛋白為底物測得該酶的最適PH值為7.5.最適溫度為45℃;該酶對熱有一定的穩定性,80℃加熱30 min仍保留部分活性;乙二胺四乙痠(EDTA)可抑製其活性,而苯甲基磺酰氟(PMSF)對其無影響.
장혈청7형저흉막폐염방선간균(APP)산동분리주접충함0.2%NAD적LB액체배양기,37℃배양48 h후,경류산안염석、DEAE-섬유소리자교환층석、포취당응효분자사층석,종기배양상청액중분리순화료1충단백매.SDS-취병희선알응효전영현시,APP단백매함유상대분자질량약위45 000적아단위.이락단백위저물측득해매적최괄PH치위7.5.최괄온도위45℃;해매대열유일정적은정성,80℃가열30 min잉보류부분활성;을이알사을산(EDTA)가억제기활성,이분갑기광선불(PMSF)대기무영향.
